[發明專利]一種燈籠果提取物及其在制備肝臟細胞氧化損傷抑制劑中的應用

在審

• 申請號: 201610162552.1
• 申請日: 2016-03-21
• 公開（公告）號: CN105596539A
• 公開（公告）日: 2016-05-25
• 發明（設計）人: 陳衛;鮑濤;趙京城;張凌霞;謝佳宏;梁文康
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A61K36/81
• 分類號: A61K36/81;A61P1/16;A61P39/06
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 鄭海峰

技術領域

本發明涉及生物技術領域，特別涉及一種燈籠果提取物及其在制備肝臟細胞氧化 損傷抑制劑中的應用。

背景技術

燈籠果(PhysalisperuvianaL.)，茄科酸漿屬一年生或多年生的草本植物，燈籠 果成熟后呈黃色，可鮮食或加工成各種食品(果醬、果脯、罐頭及沙拉等)。燈籠果酸 甜可口，營養豐富，含有較高的維生素C，并含有大量的活性物質，主要包括：多酚 類、黃酮類和有機酸類成分。燈籠果是一種全草藥用植物，在民間，包括燈籠果在內 的酸漿屬植物廣泛用于預防和治療癌癥、白血病，抑菌、利尿、抗炎及免疫調節等。

自由基被認為是引起人體衰老和某些慢性疾病發生的原因之一，當人體內的自由 基產生過多或清除過慢時，就會轉而攻擊各種細胞器官，損害機體的組織，進而引起 慢性疾病及衰老效應并誘發各種疾病。

丙烯酰胺(Acrylamide，AA)是一種具有神經毒性和潛在致癌性的化學物質國際 癌癥研究機構(IARC)1994年對其致癌性進行了評價，將丙烯酰胺列為2類致癌物 (2A)即人類可能致癌物。丙烯酰胺廣泛存在于日常生活的多種物質中，許多食物中 含有丙烯酰胺，尤其是油炸、烘烤類高淀粉食物，飲水、吸煙、化妝品和包裝材料中 也都含有丙烯酰胺。張希春等(張希春，張敏愛，丙烯酰胺肝臟代謝與細胞色素P450 2E1蛋白表達[J].現代預防醫學，2007，34(5):910-915)以1.0，2.0，4.0mmol/ml3 個劑量的AA與大鼠肝切片共同孵育，發現隨著AA濃度的增加，肝切片代謝生成的 GA也隨之增加，CYP2E1的表達也增加。肝臟是人體生物轉化和解毒的重要器官，是 AA進入人體后最初的代謝場所，能聚集高濃度的AA，而肝臟細胞色素P450中的 CYP2E1作為一種代謝外來異物的單氧合酶，可將AA氧化為GA，而GA比AA更具 細胞毒性。

因此，研制一種對肝臟損傷有保護作用的物質，尤其是由丙烯酰胺導致的肝臟損 傷有保護作用的物質是很有必要的。

發明內容

本發明公開了一種燈籠果提取物，采用模擬人體胃腸道消化的方式制備得到。采 用胃蛋白酶、胰蛋白酶等制備燈籠果提取物。本發明燈籠果提取物含有人體最終吸收 的有效成分，由于采用體外模擬的方式，最大限度的保留了有效成分，其功能性具有 實用性；而通過傳統方法提取的燈籠果產物，進入人體后，會有部分的有效物質被人 體消化系統分解消化，因而功能性具有不可預測性，不能代表進入人體后的真實情況。

一種燈籠果提取物，提取步驟如下：

(1)燈籠果鮮果與水等質量混合打漿，用HCl調pH至1.5～2，加入胃蛋白酶， 在37℃、200～300rpm下水浴振蕩2～3h；

(2)取步驟(1)得到的混合漿液，用NaOH調pH至6，再加入胰液，然后用 NaHCO3調pH至7.2～7.5，在37℃、200～300rpm下水浴振蕩2～3h后，在5000～8000 rpm條件下離心10～15min得到上清液；

(3)取步驟(2)上清液經超濾膜過濾后截留分子量大于5kDa的成分，濾出液 經真空冷凍干燥，得到燈籠果提取物；

以質量百分比計，所述燈籠果提取物中有效成分：總酚含量為45.57％-49.73％， 總黃酮含量為1.95％-5.32％，Vc含量為1.56％-1.79％，咖啡酸含量為1.02％-1.51％， 綠原酸含量為0.81％-1.28％，原花青素含量為0.01％-0.05％，總多糖含量為 41.37％-43.24％，總還原糖含量為0.42％-0.53％。

作為優選，步驟(1)中，所述HCl的濃度為5mol/L。

作為優選，步驟(1)中，所述胃蛋白酶的加入量為2000～4000單位胃蛋白酶/20g 勻漿。

作為優選，步驟(2)中，所述NaOH的濃度為1mol/L。

所述NaHCO3的濃度為1mol/L。

作為優選，步驟(2)中，所述胰液中胰酶的含量為5～6mg/mL，膽鹽的含量為 20～30mg/mL；

所述胰液的加入量為5mL/18mL混合勻漿。

本發明還公開了燈籠果提取物在制備肝臟細胞氧化損傷的抑制劑中的應用，拓展 了燈籠果的應用領域。

進一步公開了燈籠果提取物在制備由丙烯酰胺誘導的肝臟細胞氧化損傷的抑制 劑中的應用。