[發明專利]高效氯氟氰菊酯半抗原的制備方法及應用

在審

• 申請號: 201610159906.7
• 申請日: 2016-03-21
• 公開（公告）號: CN105732788A
• 公開（公告）日: 2016-07-06
• 發明（設計）人: 馮才偉;汪善良;扶勝;蔡韜;陸葦;謝體波;劉紅;李平;王大敏;牛治存
• 申請（專利權）人: 貴州勤邦食品安全科學技術有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K14/765;G01N33/68;G01N33/531
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• 代理人: 暫無信息

1.一種用于檢測高效氯氟氰菊酯殘留的抗原，是由高效氯氟氰菊酯為原料與琥珀酸酐反應合成的半抗原與載體蛋白偶聯得到，具有下述分子結構式：

其中所述的高效氯氟氰菊酯為原料與琥珀酸酐的反應合成的半抗原的分子結構式為：

所述的高效氯氟氰菊酯為原料與琥珀酸酐的反應合成的半抗原的合成方法包括以下步驟：

1）以高效氯氟氰菊酯為原料，溶解于經干燥后的二氯甲烷中，通入氮氣進行保護，得到溶液I；

2）在溶液I中加入琥珀酸酐，常溫下攪拌溶解；

3）加入催化劑三氯化鋁固體進行催化反應；

4）TLC薄層板監測反應進行，直至沒有原料，停止反應；

5）硅膠柱凈化，濃縮得到產物，即為半抗原；

其中所述的載體蛋白為：牛血清蛋白、鼠血清蛋白、兔血清蛋白、甲狀腺蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白或人血清白蛋白；

所述的高效氯氟氰菊酯為原料與琥珀酸酐的反應合成的半抗原的合成路線如下：

。

2.根據權利要求書1所述的一種用于檢測高效氯氟氰菊酯殘留的抗原，其特征在于：所述的高效氯氟氰菊酯與琥珀酸酐的反應摩爾比為1/1-1/3，催化劑三氯化鋁固體與高效氯氟氰菊酯質量比為1%-5%。

3.根據權利要求書1所述的一種用于檢測高效氯氟氰菊酯殘留的抗原的制備方法包括以下步驟：

1）稱取適量高效氯氟氰菊酯半抗原溶解于DMF溶液中，加入EDC和NHS水溶液，進行活化30分鐘，得到溶液I；

2）將載體蛋白溶于含30%DMF水溶液中,得到溶液II；將溶液I加入到溶液II中，進行偶聯，得到溶液III；

3）用0.02mol/LPB緩沖液透析溶液III，獲得高效氯氟氰菊酯抗原，分裝并于-20℃保存備用。

4.根據權利要求書1所述的一種用于檢測高效氯氟氰菊酯殘留的抗原的應用包括：制備高效氯氟氰菊酯酶聯免疫試劑盒和膠體金試紙卡。