[發(fā)明專利]血清microRNA在肝癌診斷中的應(yīng)用及診斷試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610158542.0
• 申請日: 2016-03-18
• 公開（公告）號: CN105671179B
• 公開（公告）日: 2019-12-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 莊詩美;林雪嘉;方堅(jiān)鴻;郭智偉
• 申請（專利權(quán)）人: 中山大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 44100 廣州新諾專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司
• 代理人: 劉婉

本發(fā)明公開了由血清microRNA組成的肝細(xì)胞肝癌診斷標(biāo)志物組合，以及含有這些標(biāo)志物組合的試劑盒。所述肝癌診斷標(biāo)志物組合共包括如下microRNA：hsa?miR?193a?5p、hsa?miR?143、hsa?miR?145、hsa?miR?29a、hsa?miR?133a、hsa?miR?505、hsa?miR?29c以及hsa?miR?192。本發(fā)明可用于肝癌診斷。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)診斷領(lǐng)域，具體涉及由血清microRNA組成的肝癌診斷組合，所述的血清microRNA包括hsa-miR-193a-5p、hsa-miR-143、hsa-miR-145、hsa-miR-29a、hsa-miR-133a、hsa-miR-505、hsa-miR-29c、hsa-miR-192，以及用于肝癌診斷的試劑盒及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

原發(fā)性肝癌是世界范圍內(nèi)常見的高發(fā)病率、高致死率的惡性腫瘤，其中肝細(xì)胞肝癌(簡稱肝癌,Hepatocellular Carcinoma,HCC)占原發(fā)性肝癌的90％以上。世界衛(wèi)生組織發(fā)表的《全球癌癥報(bào)告2014》指出，2012年全球肝癌新發(fā)病例位列惡性腫瘤的第五位，其致死率則位居第二位，其中中國肝癌的新發(fā)及死亡病例均約占全球病例的一半。由于缺乏有效的篩查手段，導(dǎo)致60％-70％的肝癌患者診斷時(shí)已處于晚期，錯(cuò)失根治性切除機(jī)會。可見，早期診斷，早期治療是增加肝癌患者生存率，降低肝癌死亡率最有效的途徑。

肝癌的發(fā)生發(fā)展過程是一個(gè)多因素、多階段、多步驟的過程。任何原因引起的肝硬化是肝癌最常見的危險(xiǎn)因素。在亞洲，慢性乙型肝炎病毒(HBV)引發(fā)的肝炎、肝硬化是誘發(fā)肝癌最主要的風(fēng)險(xiǎn)因素。絕大多數(shù)肝癌患者伴有肝炎和肝硬化病理改變，在歷經(jīng)肝炎、肝硬化階段后，最終發(fā)展為肝癌，人們稱之為“肝癌三部曲”。據(jù)估計(jì)，中國乙型肝炎攜帶者數(shù)量近1.2億，其中20％將發(fā)展成為慢性乙型肝炎患者，15％-40％的慢性乙型肝炎患者則將進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化。因此，對肝癌高危人群進(jìn)行長期監(jiān)測，及早發(fā)現(xiàn)并預(yù)警早期肝癌，便于確定針對性的個(gè)體化防治方案，延緩甚至防止肝癌的發(fā)生，有利于改善患者生存質(zhì)量。

目前臨床上主要通過血清甲胎蛋白(AFP)檢測或影像學(xué)檢查篩查肝癌。雖然AFP已廣泛用于肝癌篩查，但其檢出肝癌的敏感性不夠高：在臨床診斷出肝癌的患者中，約35-60％肝癌患者的AFP水平仍低于警戒值(20ng/ml)；在亞臨床肝癌中的敏感性則僅為14-40％。盡管超聲、CT、MRI等影像學(xué)檢查方法可以作為AFP檢測的補(bǔ)充，然而由于長期隨訪篩查則費(fèi)用昂貴，而且這些方法的檢出率有賴于腫瘤大小及操作者的經(jīng)驗(yàn)，因而可能出現(xiàn)誤診、漏診的情況。因此，發(fā)現(xiàn)新的高敏感性、高特異性，且低廉又易于檢測的肝癌早期診斷標(biāo)志物具有重要的臨床意義。

MicroRNA是一類廣泛存在于真核生物中的內(nèi)源性小分子非編碼RNA，長度為18-24個(gè)核苷酸(nt)。MicroRNA通過轉(zhuǎn)錄后水平抑制靶基因的表達(dá)，調(diào)控細(xì)胞分化、增殖、凋亡等生命活動，在胚胎發(fā)育、機(jī)體代謝、疾病發(fā)生發(fā)展等多種生理和病理過程中發(fā)揮重要作用。近年來，研究人員在血液、唾液、尿液等多種體液中檢測到microRNA，提出循環(huán)microRNA的概念。血液等體液標(biāo)本易于獲得，臨床可操性強(qiáng)且創(chuàng)傷性小，而且循環(huán)microRNA穩(wěn)定性好，檢測便利，因此，循環(huán)microRNA具有作為腫瘤等疾病無創(chuàng)性生物標(biāo)志物的潛能，適用于高危人群篩查。