[發明專利]一種磷脂修飾的介孔硅納米粒的制備方法

在審

• 申請號: 201610152991.4
• 申請日: 2016-03-17
• 公開（公告）號: CN107198678A
• 公開（公告）日: 2017-09-26
• 發明（設計）人: 李馨儒;劉艷;陳蒙蒙
• 申請（專利權）人: 北京大學
• 主分類號: A61K9/14
• 分類號: A61K9/14;A61K47/24;A61K49/00;A61K47/69;A61K47/54
• 代理公司: 北京萬象新悅知識產權代理事務所(普通合伙)11360
• 代理人: 蘇愛華

1.一種磷脂修飾的介孔硅納米粒的制備方法，其特征在于所描述的介孔硅納米粒可以是不帶電荷的介孔硅納米粒、帶正電荷的介孔硅納米粒以及帶熒光的介孔硅納米粒。

2.根據權利要求1所述的不帶電荷介孔硅納米粒的制備方法，其特征是：

稱取十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)0.06～0.24g，加入到由20～50ml超純水和1～10ml無水乙醇組成的混合溶劑中，于室溫下攪拌10～20分鐘。待CTAB溶解完全，向上述溶液中快速加入100～350μL氨水，攪拌片刻，緩慢滴加200～450μL正硅酸乙酯，繼續攪拌3h，即得產物分散液。

向反應液中加入適量無水乙醇，1000～6000rpm離心2～25分鐘收集沉淀，分別用去離子水和無水乙醇洗三遍，之后重新分散到50～400ml無水乙醇中，向其中加入3～33ml濃鹽酸，37～80℃條件下回流1～5小時除模板劑，1000～5500rpm離心5～15分鐘收集樣品，再次分散到含有4～15ml濃鹽酸的無水乙醇溶液中，55～75℃回流1小時，離心收集樣品，依次用適量無水乙醇和去離子水洗三遍，收集備用。

3.根據權利要求1所述的帶正電荷介孔硅納米粒的制備方法，其特征是：

稱取十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)0.30～0.90g，加入到由100～200ml超純水和10～40ml無水乙醇組成的混合溶劑中，22～55℃條件下攪拌8～21分鐘使CTAB全部溶解。向上述溶液中迅速加入0.1～2.4ml氨水，攪拌片刻，之后依次加入550～1000μL正硅酸乙酯(TEOS)和200～600μL 3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)，繼續攪拌3h，即得MSNs-NH₂的產物分散液。

向反應液中加入適量無水乙醇，1000～6000rpm離心2～25分鐘收集沉淀，分別用去離子水和無水乙醇洗三遍，之后重新分散到50～400ml無水乙醇中，向其中加入3～33ml濃鹽酸，37～80℃條件下回流1～5小時除模板劑，1000～5500rpm離心5～15分鐘收集樣品，再次分散到含有4～15ml濃鹽酸的無水乙醇溶液中，55～75℃回流1小時，離心收集樣品，依次用適量無水乙醇和去離子水洗三遍，收集備用。

4.根據權利要求1所述的帶熒光介孔硅納米粒的制備方法，其特征是：

精密稱取1.0～5.0mg異硫氫基羅丹明(RBITC)，加入到4～14ml無水乙醇中，磁力攪拌2～5分鐘使全部溶解，隨后向其中加入150～550μL 3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)，室溫條件下避光攪拌過夜，即為APTES-RBITC。

稱取0.48～0.88g十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)，加入到由100～200ml超純水和10～40ml無水乙醇組成的混合溶劑中，22～55℃條件下攪拌8～21分鐘使CTAB全部溶解。快速加入0.6～1.5ml氨水，攪拌片刻，依次加入正硅酸乙酯(TEOS)400～1500μL、3～13ml APTES-RBITC反應液，避光攪拌反應3小時，即得MSNs-RBITC產物分散液。

向反應液中加入適量無水乙醇，1000～6000rpm離心2～25分鐘收集沉淀，分別用去離子 水和無水乙醇洗三遍，之后重新分散到50～400ml無水乙醇中，向其中加入3～33ml濃鹽酸，37～80℃條件下回流1～5小時除模板劑，1000～5500rpm離心5～15分鐘收集樣品，再次分散到含有4～15ml濃鹽酸的無水乙醇溶液中，55～75℃回流1小時.離心收集樣品，依次用適量無水乙醇和去離子水洗三遍，收集備用。

5.根據權利要求1所述的一種磷脂表面修飾的介孔硅納米粒的制備方法，其特征在于所描述的磷脂是含有各種離子基團的脂材，包括天然來源的大豆磷脂、卵磷脂以及人工合成的磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇。

6.根據權利要求5所述的一種磷脂表面修飾的介孔硅納米粒的制備方法，其特征是：

稱取磷脂6～25mg，膽固醇2.5～6.0mg，用4～8ml氯仿溶解完全，于40～60℃條件下減壓旋蒸鋪膜，之后加入4～8ml去離子水，40～60℃條件下水化，探頭超聲2～30分鐘，即得脂質體。

吸取300μL濃度約為1～45mg/mL的介孔硅納米粒，加入0.6～2.5ml脂質體，每隔4～15分鐘渦旋0.5～1.5分鐘，孵育時長2小時。之后用14000rpm離心10分鐘收集納米粒，沉淀用適量去離子水洗三遍，探頭超聲分散。