[發明專利]以水為溶劑從何首烏藥材中制備二苯乙烯苷凍干粉的方法

在審

• 申請號: 201610149936.X
• 申請日: 2016-03-16
• 公開（公告）號: CN105669791A
• 公開（公告）日: 2016-06-15
• 發明（設計）人: 卞俊;胡衛敏;趙曉光;黃斌;張優琴;唐大海;鮑蕾蕾;侯正松;劉明珠
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第四一一醫院
• 主分類號: C07H15/203
• 分類號: C07H15/203;C07H1/08;A61K31/7034
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩;王婧

技術領域

本發明涉及一種從何首烏藥材中制備二苯乙烯苷(2，3，5，4′-四羥基二苯乙 烯-2-O-β-D-葡萄糖苷，簡稱二苯乙烯苷)凍干粉的制備方法，屬于天然活性產 物制備方法的技術領域。

背景技術

何首烏為蓼科植物何首烏(PolygonummultiflorumThunb)的干燥塊根，是 我國名貴中藥材。按其炮制方法不同又有生首烏和制首烏之分。生首烏味苦、甘、 澀，性平，具有潤腸、解毒和截瘧之功；制首烏味苦、甘、澀，性溫，具有補肝、 腎，益精血，壯筋骨，烏須發之效。

何首烏主要含三類有效成分，二苯乙烯苷類，蒽醌類及聚合花青素。二苯乙 烯苷是何首烏中主要有效成分，是一類具有顯著藥理活性的水溶性成分，其主要 代表成分二苯乙烯苷，也是何首烏藥材質量控制的成分。

二苯乙烯苷主要生理功效為：1、抗衰老作用，2、醒腦益智提高記憶力作用， 3、保肝作用，4、降血脂作用，5、舒張血管和抑制動脈粥樣硬化作用，6、烏發 作用。

目前已知二苯乙烯苷類有四種結構類似的化合物，提取分離含量為98％以上 難度大，現有技術中主要有聚酰胺分離法；高壓液相制備分離法；乙醇提取堿調 pH有機溶劑萃取再經酸化有機溶劑萃取法等。除高壓液相制備分離法外，要獲 得二苯乙烯苷純品較為困難。如以二苯乙烯苷四種結構類似的化合物為例，結構 和溶解度等相差無幾，所以獲得操作簡單，工藝步驟少，產品收率高，適合工業 化生產的工藝流程，確實困難。

二苯乙烯苷：分子式：C₂₀H₂₂O₉，分子量：406.38

結構式為：

發明內容

本發明的目的是提供一種制備高純度二苯乙烯苷凍干粉的方法。

為了達到上述目的，本發明提供了一種以水為溶劑從何首烏藥材中制備二苯 乙烯苷凍干粉的方法，其特征在于，包括：

第一步：將何首烏根洗凈，切片，曬干，粉碎為何首烏粉；

第二步：將第一步得到的何首烏粉用水超聲提取至少一次，過濾合并提取液；

第三步：將得到的提取液用化學純的正丁醇在分液容器中萃取至少一次，分 出正丁醇萃取液，在水浴0～70℃下，用旋轉蒸發器回收溶劑，得到含水溶性成 分的提取物；

第四步：將第三步得到的含水溶性成分的提取物用醋酸乙酯溶解，點于層析 用硅膠制備板上，晾干，置于層析缸內用展開劑展開，取出，晾干，置波長為 254nm的紫外燈下檢視，刮取紫色熒光色帶，收集，將所得的收集物與乙醇溶液 混合，超聲溶解，過濾，回收乙醇，獲得二苯乙烯苷純品；

第五步：將第四步獲得的二苯乙烯苷純品用水溶解，置于凍干機內，冷凍成 固體，抽真空將水分升華干燥成白色無定型二苯乙烯苷凍干粉。

優選地，所述的第二步中，何首烏和水的用量比為1g∶10mL(W/V)，超聲 頻率為40kHz-60kHz，超聲功率為150w-200w，超聲時間為20min-40min。

優選地，所述的第三步中，提取液和正丁醇的體積比為1∶1。

優選地，所述的第四步中，含水溶性成分的提取物和醋酸乙酯的體積比為 1g∶10mL(W/V)。

優選地，所述的第四步中的層析用硅膠制備板為GF254硅膠板，所用的展 開劑為醋酸乙酯、甲醇和水的混合物，醋酸乙酯、甲醇和水的體積比為30∶2∶ 1。

優選地，所述的第四步中的乙醇溶液的體積濃度為85％，收集物和乙醇溶液 的比例為1g∶3mL(W/V)。

優選地，所述的第四步中的超聲溶解的溫度為0-30℃，超聲頻率為 40kHz-60kHz，超聲功率為150w-200w，超聲時間為5分鐘。

優選地，所述的第四步還包括：將二苯乙烯苷純品和二苯乙烯苷對照品分別 用醋酸乙酯溶解后，點于同一硅膠GF254板上，在波長為254nm的紫外燈下檢 視，在同一位置顯相同的紫色斑點。

優選地，所述的第三步中旋轉蒸發器的壓力為0.08Mpa。