[發(fā)明專利]一種微生物胞外多糖及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610144414.0
• 申請(qǐng)日: 2016-03-14
• 公開（公告）號(hào): CN105647990B
• 公開（公告）日: 2019-07-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉建軍;趙祥穎;田延軍;趙晨;張家祥;王曉霞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東省食品發(fā)酵工業(yè)研究設(shè)計(jì)院
• 主分類號(hào): C12P19/04
• 分類號(hào): C12P19/04
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 張勇

本發(fā)明公開了一種微生物胞外多糖及其制備方法，利用假單胞菌(Pseudomonas sp.)SFEP?01進(jìn)行胞外多糖的制備，發(fā)酵胞外多糖產(chǎn)率可達(dá)8?12g/L，所產(chǎn)胞外多糖具有極強(qiáng)的凝膠活性、抗氧化活性、還原能力和清除超氧陰離子自由基的能力，該菌株所產(chǎn)胞外多糖主要含有兩種成分：EPS Ⅰ和EPS Ⅱ，EPS Ⅰ為雜多糖，單糖殘基為葡萄糖、甘露糖和鼠李糖，EPS Ⅱ?yàn)榫欢嗵?，單糖殘基為葡萄糖；所述菌株已?016年1月14日保藏在中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCC No:M2016035。所述菌株和多糖均具有良好研究開發(fā)前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物多糖領(lǐng)域，涉及一種微生物胞外多糖及其制備方法，具體涉及一種假單胞菌(Pseudomonas sp.)SFEP-01發(fā)酵制備的胞外多糖及其制備純化方法。

背景技術(shù)

微生物多糖在細(xì)胞內(nèi)主要有三種存在形式:①黏附在細(xì)胞表面上,即胞壁多糖；②分泌到培養(yǎng)基中,即胞外多糖；③構(gòu)成微生物細(xì)胞的成分,即胞內(nèi)多糖；而其中的胞外多糖具有產(chǎn)生量大、易于與菌體分離、可通過深層發(fā)酵實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。

微生物胞外多糖(Extracellular polysaccharides，EPS)是微生物在生長(zhǎng)過程中為適應(yīng)周圍環(huán)境的變化產(chǎn)生的一種對(duì)自身具有保護(hù)作用的生物高聚物。微生物胞外多糖和植物多糖相比較具有以下優(yōu)勢(shì):①生產(chǎn)周期短,不受季節(jié)、地域、病蟲害等條件的限制；②具有較強(qiáng)的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力和廣闊的發(fā)展前景；③應(yīng)用廣泛。目前已有多種微生物胞外多糖已經(jīng)發(fā)展成為一類新型的發(fā)酵產(chǎn)品，作為增稠劑、穩(wěn)定劑、乳化劑、保濕劑、膠凝劑、懸浮劑等廣泛應(yīng)用于石油、化工、食品和制藥等多個(gè)領(lǐng)域。近年來有關(guān)海洋微生物和乳酸菌微生物胞外多糖研究活躍，不斷有新型多糖結(jié)構(gòu)被鑒定。微生物多糖作為天然活性大分子，在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的潛在應(yīng)用價(jià)值也日益受到人們的廣泛關(guān)注。

新菌種的進(jìn)一步探索成為新型胞外多糖的一個(gè)重要來源。CN102816724B公開了一株放射形根瘤菌，其產(chǎn)生主要由半乳糖和葡萄糖組成的胞外多糖，其胞外多糖水溶性好，且在低濃度下具有良好的粘度、表面活性、蛋白質(zhì)可混性以及良好的穩(wěn)定性和乳化性。CN102965318B公開了一種產(chǎn)胞外多糖的嗜熱鏈球菌，該菌株在42℃條件下用M17培養(yǎng)液發(fā)酵30小時(shí)產(chǎn)胞外多糖148mg/L,胞外多糖可明顯提高發(fā)酵乳的粘度和凝膠強(qiáng)度。CN104232548A公開了一株假單胞菌，其合成的凝膠多糖為胞外多糖，將發(fā)酵條件優(yōu)化，凝膠多糖產(chǎn)量可達(dá)5.94g/L。

此外，不同的微生物菌株往往產(chǎn)生不同類型的胞外多糖，不同的胞外多糖也具有不同的結(jié)構(gòu)和/性能。到目前為止,已大量投產(chǎn)的微生物胞外多糖有黃原膠(Xanthan gum)、結(jié)冷膠(Gellan g um)、小核菌葡聚糖(Sclee roglucan)、短梗霉多糖(Pullulan)、熱凝多糖(Curdlan)等。

如何開發(fā)生產(chǎn)胞外多糖的新菌種、開發(fā)新型的胞外多糖以及提高胞外多糖的產(chǎn)量，是微生物多糖領(lǐng)域技術(shù)人員面臨的問題。

發(fā)明內(nèi)容

在現(xiàn)有技術(shù)已有開發(fā)微生物多糖的基礎(chǔ)上，本發(fā)明提供一株高產(chǎn)細(xì)菌胞外多糖的假單胞菌，并利用該菌株發(fā)酵制備胞外多糖及進(jìn)行多糖純化。該菌株能夠轉(zhuǎn)化甘油、葡萄糖、淀粉、檸檬酸鈉等產(chǎn)生凝膠型胞外多糖。

發(fā)明人從海洋真菌發(fā)酵生產(chǎn)DHA的發(fā)酵培養(yǎng)污染物中采用常規(guī)方法分離篩選得到一株高產(chǎn)胞外多糖的假單胞菌(Pseudomonas sp.)SFEP-01，該菌株保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)，保藏日期為2016年1月14日，保藏編號(hào)為CCTCC No:M2016035，保藏地址：中國(guó)武漢武漢大學(xué),其具有如下生物學(xué)特征：