[發明專利]一種藥桑多糖提取物的制備及其檢測方法

在審

• 申請號: 201610138434.7
• 申請日: 2016-03-11
• 公開（公告）號: CN105693877A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發明（設計）人: 馬曉麗;李新霞;孟磊;孫蓮
• 申請（專利權）人: 新疆醫科大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;G01N27/447
• 代理公司: 北京中恒高博知識產權代理有限公司 11249
• 代理人: 陸菊華

技術領域

本發明涉及一種藥桑多糖提取物的制備及其檢測方法。

背景技術

藥桑屬黑桑種(MorusnigraLinn)，為天然22倍體半栽培類型野生桑樹種質資 源，僅分布于新疆阿克蘇、和田和喀什地區，是新疆獨特的藥用果桑種質資源，藥桑椹更是 作為維吾爾族重要的民間藥材，維吾爾族稱其為“夏圖土”。能健腦安神、益脾胃、補血養肝， 用于治療心悸失眠、健忘、脾胃虛寒和黃疸肝炎等疾病。

高效毛細管電泳法（HPCE）是近年發展起來的一種具有高效快速、靈敏度高、自動 化高、經濟環保等優點，已成為生物化學和分析化學領域中發展最快的一種分離分析技術， 已引起藥物分析界的廣泛重視。但也存在著重現性差、制備能力差等缺點。

目前為止，現有技術一般采用水煮醇沉法提取藥桑多糖，但多糖產率不高。且缺少 一種對藥桑多糖提取物進行評價的方法，使得提取物的質量參差不齊，不利于工業化生產。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術的上述不足，提供了一種藥桑多糖提取物的制備方 法，以提高藥桑多糖提取物的產率。

本發明的另一目的是提供一種藥桑多糖提取物的檢測方法，以對藥桑的提取質量 進行評價，實現控制提取質量的穩定。

為了解決上述技術問題，本發明提供了如下的技術方案：

一種藥桑多糖提取物的制備方法，包括如下步驟：

（1）將藥桑粉末和蒸餾水混合,在60℃下超聲提取兩次，每次提取30分鐘，料液比1:10 （g/mL），過濾，合并濾液，濃縮；

（2）將步驟（1）濃縮得到的濃縮液與乙醇按體積比1:4混合，靜置醇沉24小時；

（3）將步驟（2）醇沉得到的沉淀減壓干燥，即得到藥桑多糖提取物。

進一步，步驟（1）超聲提取時，超聲波頻率為59KHz。

進一步，步驟（1）濾液濃縮后的體積與藥桑粉末的質量比為1mL：1g。

一種藥桑多糖提取物的檢測方法，包括如下步驟：

（1）藥桑多糖提取物在三氟乙酸水溶液中進行酸水解，酸水解后，除去三氟乙酸，殘余 物用水溶解，得供試液；

（2）單糖混合標準溶液的衍生化：向單糖混合標準溶液中加入1-苯基-3-甲基-5-吡唑 啉酮，在堿性條件下加熱反應，冷卻，加酸中和，然后用氯仿萃取，取上層液，所述單糖為葡 萄糖、甘露糖、半乳糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、木糖和/或阿拉伯糖；

（3）將步驟（2）得到的上層液上毛細管電泳儀檢測，獲得濃度與峰面積的標準曲線，電 泳條件：緩沖液采用濃度為180mmol/L、pH=10.05的硼酸緩沖溶液，電壓15kV，檢測波長 245nm；

（4）步驟（1）的供試液先按步驟（2）的衍生化方法進行處理，再按步驟（3）的電泳條件上 毛細管電泳儀檢測；

（5）根據步驟（4）檢測得到的峰面積以及步驟（3）的標準曲線，得到供試液中葡萄糖、甘 露糖、半乳糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、木糖和/或阿拉伯糖的濃度。

進一步，步驟（1）在105℃下酸水解4小時，三氟乙酸水溶液的濃度2mol/L。

進一步，步驟（1）酸水解后，向體系加入甲醇，蒸發濃縮除去三氟乙酸。

進一步，步驟（2）在pH=10-12的堿性條件下，于70℃反應30min。

衍生化時，相對于單糖而言，1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮的用量保持過量。

與水浴提取相比，本發明采用超聲波輔助提取可以明顯提高藥桑多糖提取物的產 率。而本發明提供的檢測方法具有良好的重復性、穩定性和精密度，從而可用于評價藥桑提 取質量，以實現提取質量的穩定控制。

附圖說明

附圖用來提供對本發明的進一步理解，并且構成說明書的一部分，與本發明的實 施例一起用于解釋本發明，并不構成對本發明的限制。在附圖中：

圖1為單糖混合標準品PMP衍生物的毛細管電泳譜圖；

圖2為藥桑多糖提取物水解后PMP衍生物的毛細管電泳譜圖。

具體實施方式

以下對本發明的優選實施例進行說明，應當理解，此處所描述的優選實施例僅用 于說明和解釋本發明，并不用于限定本發明。

1.1材料與試劑