[發明專利]一種匍枝馬尾藻無性種苗繁育的方法

在審

• 申請號: 201610137819.1
• 申請日: 2016-03-09
• 公開（公告）號: CN105746353A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發明（設計）人: 朱軍;鮑時翔;蘇醒;鄒瀟瀟;林勇
• 申請（專利權）人: 中國熱帶農業科學院熱帶生物技術研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種采用組織培養來大量繁育匍枝馬尾藻種苗的方法，具體步驟如下：

1)選取生長良好的匍枝馬尾藻新鮮藻體，去除藻體表面的雜藻和附著物，再用滅菌過濾海水反復沖洗4-6遍。將藻體置于20-22℃，光照強度2000-4000lx，光周期14D：10L條件下暫養。

2)選取匍枝馬尾藻樣品中完整的幼嫩側枝用70-75％酒精消毒5-10秒，然后用質量濃度0.8-1.4％的次氯酸鈉消毒處理8-15分鐘，再用滅菌過濾海水沖洗2-4遍。將幼嫩側枝的莖或葉片切段用鑷子放入事前準備好的培養液中。

3)培養7-10天后莖或葉片切段切口處生出數簇不定芽，培養液5-7天更換一次，培養14-16天后不定芽形成再生葉片；以再生葉片為外植體繼續誘導不定芽，連續誘導5-6代后產生大量不定芽。

4)將不定芽從切段分離，離體培養20-25天，誘導不定芽再生出假根形成完整再生苗，為人工栽培提供大量種苗。

2.按照權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟1)中，匍枝馬尾藻樣品樣暫養培養液為滅菌過濾海水，內含0.05-0.1mol/LNaNO₃和0.01-0.05mol/LNaH₂PO₄。

3.按照權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟2)中，將幼嫩側枝的葉片橫切成3-5mm切段或將幼嫩側枝的莖橫切成2-5mm的切段放入事前準備好的培養液中培養。

4.按照權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟2)中，不定芽誘導方法是外植體采用PESI培養基，在20-25℃，光照強度1000-4000lx，光照周期的光照∶黑暗＝8-10∶16-14h條件下培養7-10天。

5.按照權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟3)中，不定芽形成的再生葉片可以連續多代作為再生源誘導不定芽，選取5-10mm的再生葉片橫切成2-3mm切段放入事前準備好的培養液中培養。

6.按照權利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟4)中，假根誘導方法是不定芽采用PESI培養基+0.1～0.5mg/L6-BA，在24-27℃，光照強度1500-3000lx，光照周期的光照∶黑暗＝10-12∶14-12h條件下培養20-25天。