[發明專利]一種用于預防疫苗注射后耦合性出血的維生素K1的快速檢測方法

在審

• 申請號: 201610129676.X
• 申請日: 2016-03-08
• 公開（公告）號: CN105784818A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發明（設計）人: 王城玉
• 申請（專利權）人: 中逸安科生物技術股份有限公司
• 主分類號: G01N27/48
• 分類號: G01N27/48;G01N27/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于預防疫苗注射后耦合性出血的維生素K1的快速檢測方法，其具體操作方法 為：

（1）電極制備：所述電極采用納米二氧化鈦修飾玻碳電極，所述納米二氧化鈦修飾玻碳 電極的制備方法為，將玻碳電極用0.1-0.2μm的三氧化二鋁粉拋光，將納米二氧化鈦按照 12g/L的濃度進行配置，納米二氧化鈦粒徑為15到17nm之間，選擇超聲法對二氧化鈦溶液進 行分散30min，形成乳白色分散液，選擇15μl分散液作為最佳覆蓋量，具體方法是將15μl上 述分散液滴加在玻碳電極表面，室溫下風干，重復兩次；

（2）利用電極進行測試，制作10支修飾電極，檢測濃度為1.0ng/ml的維生素K1標準液, 得到的電流的平均值為7.597±0.14μA（n=10,RSD=1.85%），然后利用伏安法進行維生素K1 檢測；

（3）建立標準曲線：配制不同維生素K1含量的標準溶液，加入支持電解液中，通入高純 氮氣除氧，用電化學工作站對每個標準溶液進行電壓掃描，用標準溶液于-0.45V處的峰 電流值與維生素K1含量建立標準曲線，維生素K1標準品的純度為99%；

（4）樣品的制備和測定：將4ml人血樣品置7ml的塑料離心管中，高速離心10min,轉速 5000rpm，取上清液于35~40攝氏度水浴上用氮吹儀吹干，殘余用5.0mol/LNaAc-HAc緩沖液 2ml溶解，待用，將被測樣品加入支持電解液中，樣品液用氮氣純化10min,在與建立標準曲 線相同的條件下測定其于-0.45V處的峰電流值，由標準曲線得到該峰電流值對應的維生 素K1含量即為被測樣品的維生素K1含量。

2.按照權利要求1所述的一種用于預防疫苗注射后耦合性出血的維生素K1的快速檢測 方法，其特征在于所述電極為玻碳電極，所述玻碳電極極基體上包覆有一層納米二氧化鈦 層。

3.按照權利要求1所述的一種用于預防疫苗注射后耦合性出血的維生素K1的快速檢測 方法，其特征在于所述納米二氧化鈦層的納米二氧化鈦粒徑為15到17nm之間。

4.按照權利要求1所述的一種用于預防疫苗注射后耦合性出血的維生素K1的快速檢測 方法，其特征在于所述納米二氧化鈦層的制備方法是，將玻碳電極用0.1~0.2μm的三氧化二 鋁粉拋光，選擇超聲法對二氧化鈦進行分散30min，形成二氧化鈦分散液，選擇15μl，含納米 二氧化鈦12g/L的乳白色分散液作為最佳覆蓋量，

具體方法是將15μl上述分散液均勻滴加在玻碳電極表面，室溫下風干，重復兩次。

5.按照權利要求1所述的一種用于預防疫苗注射后耦合性出血的維生素K1的快速檢測 方法，其特征在于所述電解液濃度為5.0mol/LNaAc-HAc，所述脈沖伏安法的掃描速度為30 mV/s，富集電位為-0.45V，富集時間為100s，掃描起止電位-0.3V~-0.8V，脈沖高度0.05V，脈 沖寬度0.04s，電位階躍0.006V。

6.按照權利要求1所述的一種用于預防疫苗注射后耦合性出血的維生素K1的快速檢測 方法，其特征在于所述電化學工作站的工作特征是三電極體系，覆納米二氧化鈦玻碳電極 為工作電極，飽和甘汞電極為參比電極，鉑電極為輔助電極。

7.按照權利要求1所述的一種用于預防疫苗注射后耦合性出血的維生素K1的快速檢測 方法，其特征在于所述電極為工作電極，用于疫苗注射前血液中維生素K1含量的檢測，應用 于預防疫苗注射后由于維生素K缺乏所導致的耦合性出血癥。