[發明專利]一種制備高純度沒食子兒茶素GC的方法

有效

• 申請號: 201610129513.1
• 申請日: 2016-03-08
• 公開（公告）號: CN105693679B
• 公開（公告）日: 2017-12-29
• 發明（設計）人: 王智聰;沙躍兵;余笑波;陳怡
• 申請（專利權）人: 浙江省計量科學研究院
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司33100
• 代理人: 王佳健

1.一種制備高純度沒食子兒茶素GC的方法，其特征在于包括如下步驟：

步驟（1）：取一定量的綠茶茶多酚樣品，加適量溶劑溶解；

步驟（2）：取步驟（1）制備的茶多酚溶解樣品適量于密閉容器，高溫轉化一定時間；

步驟（3）：取步驟（2）制備的轉化液，采用快速制備液相色譜進行分離，收集沒食子兒茶素GC餾分；多次進樣，收集且合并相同組分的餾分；餾分通過旋轉蒸發濃縮并除去甲醇，濃縮液再經冷凍干燥，制得沒食子兒茶素GC單體化合物粗品；

步驟（4）：取步驟（3）制得的沒食子兒茶素GC單體化合物粗品適量，加一定溶劑溶解；利用高壓制備液相色譜分離純化上述單體化合物粗品，收集沒食子兒茶素GC餾分；多次進樣，收集且合并相同組分的餾分；餾分通過旋轉蒸發濃縮并除去甲醇，濃縮液再進行冷凍干燥和真空干燥，制得沒食子兒茶素GC高純單體化合物；

步驟（3）中，快速制備液相色譜的色譜填料選用硅膠鍵合C18、C8、C4；填料粒徑選擇5~100 μm；

快速制備液相色譜分離中，流動相體系采用水、甲醇、乙腈、乙醇，或它們之間適當比例的混合液；流動相中添加的調節劑包括甲酸、乙酸、磷酸；

快速制備液相色譜收集沒食子兒茶素GC餾分旋轉蒸發濃縮的溫度選擇40~80 ?C；

快速制備液相色譜分離中，采用如下分離條件：流動相A：甲醇，流動相B：體積比為0.1%的乙酸水溶液；流速：50 mL/min，梯度洗脫：15%A 對應于0 min – 20%A對應于5 min – 25%A對應于10 min– 30%A對應于25 min – 35%A對應于30 min – 50%A對應于40 min；上樣量：3 mL；檢測波長：278 nm；

步驟（4）中，溶劑采用超純水、甲醇、乙腈、乙醇或其混合溶液進行溶解，對沒食子兒茶素GC單體化合物粗品，配制1~1000 mg/mL的濃度；

高壓制備液相色譜柱的色譜填料，采用硅膠鍵合C18填料，填料粒徑為10 μm，色譜柱尺寸為21.5*250 mm；

高壓制備液相色譜收集沒食子兒茶素GC餾分旋轉蒸發濃縮的溫度選擇40~80 ?C；

高壓制備液相色譜分離中，采用如下分離條件：流動相A：甲醇；流動相B：體積比為0.1%的乙酸水溶液；等度洗脫：20%A；流速：25 mL/min；上樣量：2 mL；檢測波長：278 nm。

2.根據權利要求1所述的一種制備高純度沒食子兒茶素GC的方法，其特征在于：步驟（1）中，綠茶茶多酚樣品選擇總兒茶素含量大于98%及咖啡因含量小于0.1%的產品。

3.根據權利要求1所述的一種制備高純度沒食子兒茶素GC的方法，其特征在于：步驟（1）中，所述溶劑為超純水、甲醇、乙腈、乙醇及其混合溶液，茶多酚樣品的濃度為100~1000 mg/mL。

4.根據權利要求1所述的一種制備高純度沒食子兒茶素GC的方法，其特征在于：步驟（2）中，高溫轉化溫度選100~150 ?C，高溫轉化時間選10~300 min。