[發(fā)明專利]一種紫花苜蓿生物活性肽的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610129481.5
• 申請日: 2016-03-08
• 公開（公告）號: CN105624248B
• 公開（公告）日: 2020-02-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳憶鳳;朱勤;畢銀
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇天福萊集團(tuán)有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 32255 連云港潤知專利代理事務(wù)所
• 代理人: 劉喜蓮

一種紫花苜蓿生物活性肽的制備方法，它以紫花苜蓿鮮草或干草為原料，經(jīng)篩選去雜、清洗、瀝干、粉碎、加水勻漿，得到原料液；向原料液中加入胰蛋白酶進(jìn)行酶解；酶解結(jié)束后進(jìn)行滅酶處理，滅酶后的混合液經(jīng)離心或過濾，得到上清液或?yàn)V液；上清液或?yàn)V液經(jīng)真空濃縮處理，得到紫花苜蓿生物活性肽膏；紫花苜蓿生物活性肽膏經(jīng)冷凍干燥處理，得到紫花苜蓿生物活性肽粉。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明直接用胰蛋白酶對紫花苜蓿進(jìn)行酶解，工藝簡便、生產(chǎn)成本低，肽得率高，水解度可達(dá)到32.56%，肽段分子量主要集中在1000Da以下，制得的紫花苜蓿生物活性肽具有較強(qiáng)的二苯代苦味肼基自由基（DPPH·）清除能力，可在食品、保健品、化妝品及飼料加工等領(lǐng)域推廣應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物來源生物活性肽的制備領(lǐng)域，尤其是一種紫花苜蓿生物活性肽的制備方法。

背景技術(shù)

紫花苜蓿系豆科，屬于多年生草本植物，是世界上種植最廣、栽培最早的牧草，具有產(chǎn)量高、適口性好、營養(yǎng)豐富等特點(diǎn)所以被譽(yù)為“牧草之王”，在我國東北、華北、西北等地區(qū)已經(jīng)普遍種植。紫花苜蓿的氨基酸種類較為齊全且均衡，營養(yǎng)價(jià)值較高，是一種優(yōu)良的植物性蛋白資源。

目前，國內(nèi)外對于紫花苜蓿的研究主要集中在育種、種植、篩選及黃酮類化合物、葉蛋白的提取等方面，現(xiàn)有技術(shù)中對紫花苜蓿生物活性肽的研究很少。其中，張勇等對堿性蛋白酶水解苜蓿葉蛋白制備寡肽的最佳條件進(jìn)行了研究，最佳條件下水解度為27.50％，寡肽的平均肽鏈長度為3.64（中國飼料，2007，18：15-17）；在中國發(fā)明專利申請公開說明書CN104195204A中公開了一種紫花苜蓿多肽的制備方法，采用加熱法獲得紫花苜蓿粗蛋白，再經(jīng)乙醇浸提脫色脫腥，后用Protamex酶和Flavourzyme1000L酶酶解紫花苜蓿粗蛋白，最后經(jīng)噴霧干燥得到紫花苜蓿多肽，多肽含量達(dá) 70％～75％，所得的肽粉無苦澀感，可直接服用。但是上述兩種方法均是先從苜蓿草中提取出葉蛋白后再將其酶解進(jìn)行多肽制備的，葉蛋白提取率低，能耗大，此兩種方法均存在工藝繁雜、生產(chǎn)成本高的缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種工藝簡便、生產(chǎn)成本低、成品具有較強(qiáng)抗氧化活性的紫花苜蓿生物活性肽的制備方法。

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下的技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的。本發(fā)明是一種紫花苜蓿生物活性肽的制備方法，其特點(diǎn)是，其步驟如下：

（1）原料處理：取紫花苜蓿鮮草或干草，篩選去雜、清洗、瀝干后投入粉碎機(jī)粉碎，粉碎后按料水質(zhì)量比1:9~1:11加水勻漿，得到原料液；

（2）酶解：將上述原料液泵入酶解罐，用氫氧化鈉溶液或鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH，并不斷攪拌，按加酶量800~1200U/g底物蛋白向上述原料液中加入胰蛋白酶進(jìn)行酶解，酶解工藝參數(shù)為：酶解時(shí)間3~5.5h，酶解溫度45~60℃，酶解pH 6~7.5；

（3）滅酶：酶解結(jié)束后升溫至90℃以上，保持10min，滅酶，冷卻，對滅酶后的混合物進(jìn)行離心處理，得上清液，或?qū)⑺鰷缑负蟮幕旌衔镞^濾，得濾液；

（4）真空濃縮：對上述清液或?yàn)V液抽入濃縮罐進(jìn)行濃縮處理，濃縮溫度為50~65℃，濃縮至最終水分含量在40~60%，即得到紫花苜蓿生物活性肽膏。

（5）冷凍干燥：對上述紫花苜蓿生物活性肽膏進(jìn)行冷凍干燥處理，干燥溫度為-60~-40℃，干燥至最終水分含量在10%以下，即得到紫花苜蓿生物活性肽粉。

本發(fā)明所述的紫花苜蓿生物活性肽的制備方法中，進(jìn)一步優(yōu)選的技術(shù)方案或者技術(shù)特征是：

1、在步驟（1）中：勻漿時(shí)原料與水的質(zhì)量比為1:10。

2、在步驟（2）中：按加酶量900U/g底物蛋白向上述原料液中加入胰蛋白酶進(jìn)行酶，酶解工藝參數(shù)為：酶解時(shí)間4h，酶解溫度55℃，酶解pH 6.5。