[發明專利]一種從牛蒡子中分離牛蒡子油、牛蒡苷、牛蒡苷元、牛蒡酚E和牛蒡酚H的方法

有效

• 申請號: 201610129419.6
• 申請日: 2016-03-08
• 公開（公告）號: CN105669797B
• 公開（公告）日: 2018-05-04
• 發明（設計）人: 劉睿斌;劉俊敏;周在富;張起輝;宋少輝;蘇其果;蔣蒨;林泉松;吳華;孫宗良;張育珍;鄭陽
• 申請（專利權）人: 重慶科瑞制藥（集團）有限公司
• 主分類號: C07H15/26
• 分類號: C07H15/26;C07H1/08;C07D307/33;C11B1/10
• 代理公司: 重慶博凱知識產權代理有限公司50212
• 代理人: 張先蕓,李華華

技術領域

本發明屬于分離提取技術領域，涉及一種從牛蒡子中分離牛蒡子油及木脂類化合物的方法，具體涉及一種從牛蒡子中分離牛蒡子油、牛蒡苷、牛蒡苷元、牛蒡酚E和牛蒡酚H的方法。

背景技術

牛蒡子是菊科牛蒡屬（Arctium lappa L.）二年生草本植物牛蒡的干燥成熟果實，其廣泛分布于東亞國家，屬解表藥中發散風熱藥，具有疏散風熱、宣肺透疹、消腫解毒之功效，為歷版《中國藥典》所收錄。現代藥理研究證明牛蒡子具有抗炎、抗腫瘤、降血壓和調節免疫等活性，其化學成分主要含揮發油類和木脂素類，其中木脂素類成分主要包括牛蒡苷、牛蒡苷元、牛蒡酚E、牛蒡酚H。牛蒡子中牛蒡油、牛蒡苷元、牛蒡苷這些化學成分在治療適應癥方面有一定的區別，需要根據治療作用選擇相應的目標成分，牛蒡油主要為萜類和倍半萜類揮發油以及脂肪酸類化合物，具有較好的抗菌效果；牛蒡苷和牛蒡苷元均具有抗炎鎮痛、治療糖尿病并發癥等方面的作用，但牛蒡苷和牛蒡苷元療效上也存在略微的差異性，牛蒡苷具有良好的抗腫瘤、抗炎、鎮痛的作用，牛蒡苷元具有良好的抗糖尿病血管性病變的作用。由此可見，牛蒡子提取物具有良好的藥理效果，但怎么能夠充分利用牛蒡子藥材資源，將其中的成分逐一獲得是目前牛蒡子提取分離工藝的難點。

專利CN101278940A提供了用牛蒡苷和牛蒡苷元組成不同組合物比例治療糖尿病性心血管病變的作用，確定了最佳的比例，但該制備方法復雜，需先用牛蒡子藥材經大孔樹脂獲得牛蒡子苷，再又用牛蒡子藥材經硅膠柱層析獲得牛蒡子苷元，隨后將牛蒡苷和牛蒡苷元組成不同比例的混合物進行篩選，太過于繁瑣。專利 CN1323674C提供了一種用于治療糖尿病腎病或糖尿病的牛蒡子總木脂素苷類提取物的制備方法，獲得了牛蒡子總木脂素苷類物質50-90%（紫外分光光度法測定）的提取物原料，用于治療糖尿病腎病和糖尿病，解決了糖尿病腎病或糖尿病的專用藥物，但該方法中原料為總木脂素，且未有進一步提純，未獲得主要活性成分牛蒡苷、牛蒡苷元、牛蒡酚E和牛蒡酚H，提取物中多糖等雜質也未進行分離，存在一定的不足。專利CN1000443493C提供了一種制備牛蒡苷和牛蒡苷元的制備方法，該專利采用有機溶劑脫脂、聚酰胺柱層析的方法獲得了牛蒡子油，同時也獲得了牛蒡苷及其苷元的混合物，但該工藝使用有機溶劑提取牛蒡子藥材，有機溶劑用量大、對環境的影響也大，并且所獲得的牛蒡苷、牛蒡苷元為混合物，不能根據治療特點選用相應的化學成分組成混合物。

因此，為進一步使中藥現代化，提高木脂素類成分應用范圍及應用效果，有必要對牛蒡子木脂素類成分進行單獨分離，獲得其主要活性成分，根據食品藥品領域的需要，單獨應用或分別按需求以不同比例應用，但目前并沒有充分利用牛蒡子藥材同時取得牛蒡油、牛蒡苷、牛蒡苷元及其它木脂素類化學成分的方法。

發明內容

針對現有技術存在的上述不足，本發明所要解決的技術問題是：如何提供一種從牛蒡子中分離牛蒡子油、牛蒡苷、牛蒡苷元、牛蒡酚E和牛蒡酚H的方法，使其能夠通過一條路線同時從牛蒡子中分離出牛蒡子油、牛蒡苷元、牛蒡苷、牛蒡酚E和牛蒡酚H，并且具有充分利用原料、分離方法簡單高效、實用性好、環境污染小的特點。

為了解決上述技術問題，本發明采用如下技術方案：一種從牛蒡子中分離牛蒡子油、牛蒡苷、牛蒡苷元、牛蒡酚E和牛蒡酚H的方法，包括如下步驟：

1）將牛蒡子粉碎后進行CO₂超臨界萃取脫脂5~7小時，得到牛蒡子油和脫脂牛蒡子粉；

2）對步驟1）得到的脫脂牛蒡子粉回流提取3~4次，過濾每次提取的提取液，合并濾液并進行濃縮，得到提取浸膏；其中，提取液為質量濃度為50~95%的水醇溶液，每次提取時所述提取液的使用質量為所述脫脂牛蒡子粉質量的5~10倍，每次提取時間為0.5~2小時；

3）采用CH₂Cl₂萃取步驟2）得到的提取浸膏2~3次，合并萃取液，得到待分離樣品；其中，所述CH₂Cl₂與所述提取浸膏的質量體積比為2~3 mL:1 g；

4）將步驟3）得到的待分離樣品濃縮，加入拌樣硅膠拌樣，進行硅膠柱色譜層析，采用梯度洗脫模式，所述梯度洗脫使用的洗脫液依次為體積比100:0、100: 2、100: 5、100: 8、100: 10和0:100的二氯甲烷-甲醇溶液，每個梯度洗脫5~8個保留體積，每1/3保留體積收集為一個餾分；其中，所述硅膠柱色譜層析中拌樣硅膠與待分離樣品的質量比為1~2:1，填料硅膠與拌樣硅膠的質量比為5~15:1；