[發明專利]一種金魚藻組織培養與快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201610123366.7
• 申請日: 2016-03-06
• 公開（公告）號: CN105638481A
• 公開（公告）日: 2016-06-08
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 水生藻安生物科技（武漢）有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 林松海

1.一種金魚藻組織培養與快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步驟：

A、外植體選擇與預處理：選擇生長健壯，顏色鮮綠，無病蟲害的可萌發腋芽的金魚藻莖 段作為外植體，然后用洗滌劑浸泡，無菌水清洗進行預處理；

B、外植體滅菌：

用酒精和植物組織抗菌劑處理外植體，制備無菌外植體；

C、芽誘導：選擇0.50mg/L6-BA和1.30mg/LIAA的MS固體培養基，蔗糖質量體積濃度 為3%，pH調至5.8-6.0，固體培養基裝于50毫升三角瓶中，每瓶20毫升；固體培養基經過120 ℃滅菌處理20min，冷卻后，接入滅菌處理后的1-1.5cm的金魚藻外植體，于光照培養箱中靜 置培養，待幼芽長至1.0-1.5cm進行增殖培養；

D、增殖培養：選擇蔗糖質量體積濃度1.5%的1/2MS液體培養基，添加0.5-2.00mg/L 6-BA和0.01-1.00mg/LIAA的激素；液體培養基分裝于200毫升三角瓶中，每瓶100毫升，培 養基滅菌方式與芽誘導相同，接入長1.0-1.5cm的幼芽置于光照培養箱中靜置，進行增殖培 養；

E、煉苗和移栽：待金魚藻無菌苗長至4.0cm即可煉苗，打開瓶蓋，室溫下煉苗1-2d后洗 凈培養基，取出試管苗，移栽至自然水體中；

所述的步驟C，D，E均采用無菌環境，光照60-70μE/（m²·s），光照周期為12h/d，室內溫度 （25±2）℃。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟A中，預處理的具體步驟如下：用 堿性洗滌劑浸泡30min，再用自來水沖洗1小時，用蒸餾水反復沖洗4-5次，用無菌水再反復 清洗4-5次，置于無菌操作臺。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟B中，在無菌操作臺上首先用75% 乙醇浸泡15秒，用無菌水沖洗4-5次，再用5%植物組培抗菌劑PPM進行表面消毒5min，無菌水 沖洗4-5次，在無菌濾紙上將水吸干，待用。