[發(fā)明專(zhuān)利]一種羅漢果苷V含量≥95％的羅漢果提取物的制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610121910.4
• 申請(qǐng)日: 2016-03-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105713061A
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張寶堂;譚家忠;李芳
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 湖南綠蔓生物科技股份有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07J17/00
• 分類(lèi)號(hào): C07J17/00
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.一種羅漢果提取物的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：

步驟一：挑選羅漢果，水洗去除臟污，擠壓破碎，按照原料重量kg比蒸餾水體積L為1:3向原料中加入蒸餾水，加熱使沸騰，提取0.5～1.5小時(shí)，提取3次，合并提取液；

步驟二：在提取液中加入相對(duì)原料重量10～15％的質(zhì)量濃度為0.5％的殼聚糖乙酸水溶液，充分?jǐn)嚢瑁瑢⒗鋮s提取液到室溫，離心過(guò)濾，得到濾液；

步驟三：按照原料重量kg比樹(shù)脂體積L為1:1～1.2，將濾液按照流速為2～3BV/h過(guò)樹(shù)脂柱，用蒸餾水按照相同流速洗脫樹(shù)脂柱，棄掉第1～3BV的洗脫液，取第4～6BV洗脫液，真空濃縮至原料重量的1/25～1/20；

步驟四：將濃縮液pH值調(diào)節(jié)至10～11，在8～12℃冷藏結(jié)晶，1周后，離心過(guò)濾無(wú)定形絮狀物，將離心液在2～5℃冷藏，結(jié)晶1周，低溫離心過(guò)濾無(wú)定形絮狀物，將離心液真空濃縮，干燥得到粗品；

步驟五：按照粗品重量比硅膠重量為1:15～20，徑高比為1:8，上硅膠柱層析，先用二氯甲烷：甲醇體積比為100:15，洗脫15BV，去除雜質(zhì)；再用二氯甲烷：甲醇體積比為100:35洗脫，收集用HPLC檢測(cè)到的羅漢果苷V≥95％組分，真空濃縮干燥，即得。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的羅漢果提取物的制備方法，其特征在于，在步驟一中，所挑選的羅漢果為果皮完整的金黃色的成熟羅漢果。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的羅漢果提取物的制備方法，其特征在于，在步驟三中，所述的樹(shù)脂柱為L(zhǎng)SA-700B弱堿性大孔吸附樹(shù)脂柱。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的羅漢果提取物的制備方法，其特征在于，在步驟三至五中，所述真空濃縮的真空度為0.08～0.09MPa。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的羅漢果提取物的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：

步驟一：挑選果皮完整的金黃色的成熟羅漢果，水洗去除臟污，擠壓破碎，按照原料重量kg比蒸餾水體積L為1:3向原料中加入蒸餾水，加熱使沸騰，提取1小時(shí)，提取3次，合并提取液；

步驟二：在提取液中加入相對(duì)原料重量10％的質(zhì)量濃度為0.5％的殼聚糖乙酸水溶液，充分?jǐn)嚢瑁瑢⒗鋮s提取液到室溫，離心過(guò)濾，得到濾液；

步驟三：按照原料重量kg比樹(shù)脂體積L為1:1，將濾液按照流速為2～3BV/h過(guò)LSA-700B弱堿性大孔吸附樹(shù)脂柱，用蒸餾水按照相同流速洗脫樹(shù)脂柱，棄掉第1～3BV的洗脫液，取第4～6BV洗脫液，真空濃縮至原料重量的1/20；

步驟四：將濃縮液pH值調(diào)節(jié)至10.5，在10℃冷藏結(jié)晶，1周后，離心過(guò)濾無(wú)定形絮狀物，將離心液在4℃冷藏，結(jié)晶1周，低溫離心過(guò)濾無(wú)定形絮狀物，將離心液真空濃縮，干燥得到粗品；

步驟五：按照粗品重量比硅膠重量為1:18，徑高比為1:8，上硅膠柱層析，先用二氯甲烷：甲醇體積比為100:15，洗脫15BV，去除雜質(zhì)；再用二氯甲烷：甲醇體積比為100:35洗脫，收集用HPLC檢測(cè)到的羅漢果苷V≥95％組分，真空濃縮干燥，即得。

6.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的羅漢果提取物的制備方法所制得的羅漢果提取物，其特征在于，其中漢果苷V含量≥95％。