[發明專利]褐藻酸硫酸酯在制備預防和治療由人乳頭瘤狀病毒引起的疾病的藥物和保健品中的應用

有效

• 申請號: 201610118796.X
• 申請日: 2016-03-03
• 公開（公告）號: CN105748506B
• 公開（公告）日: 2018-08-17
• 發明（設計）人: 管華詩;王世欣;王偉;李春霞;李鵬麗;王洪光;夏萱;張曉霜
• 申請（專利權）人: 青島海洋生物醫藥研究院股份有限公司
• 主分類號: A61K31/737
• 分類號: A61K31/737;A61P31/12;A61P35/00;A61P17/00;A23L33/10
• 代理公司: 青島致嘉知識產權代理事務所(普通合伙) 37236
• 代理人: 劉曉

本發明提供了褐藻酸硫酸酯在制備預防和治療由人乳頭瘤狀病毒引起的疾病的藥物和保健品中的應用，本發明通過實驗證明褐藻酸硫酸酯對HPV假病毒侵染過程具有強抑制作用，且成劑量依賴關系；褐藻酸硫酸酯對HPV轉化的Hela和Caski細胞內的病毒E6基因和E7基因及其蛋白的表達均有抑制作用，且成劑量依賴關系。通過系列系統科學實驗證明所述褐藻酸硫酸酯可以開發成抗人乳頭瘤狀病毒的藥物和保健品，具有良好的市場應用前景。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及褐藻酸硫酸酯在制備預防和治療由人乳頭瘤狀病毒引起的疾病的藥物和保健品中的應用。

背景技術

人乳頭瘤病毒(human papillomavirus，HPV)作為通過性傳播感染的常見的病原體，是威脅現代人生命安全的主要病毒之一。HPV有100多種分型，可引起多種病變，其中主要引發疾病的有13種高危型及5種低危型。高危型HPV的感染與一些肛門生殖器區腫瘤的發生之間有著一定關聯，其中HPV16、HPV18亞型的長期感染已經被證實為宮頸癌發生的一個主要誘因。目前市面上還沒有針對HPV的特效防治藥物，且HPV疫苗主要適應于未有性活動的女性。因此，研發新型特效的抗HPV藥物具有重要意義。

由于HPV的增殖依賴于上皮細胞的分化，因而其在體外基本無法存活。目前認為生產假病毒是模擬HPV感染最有效的方法。HPV在哺乳動物細胞中可表達衣殼蛋白L1、L2，這兩種蛋白在體外具有自我組裝成病毒樣顆粒(Virus-like particle，VLP)并包裹病毒基因組或外源基因的能力，形成與天然病毒結構及免疫原性一致的假病毒(PsV)。美國NIH的Buck教授等在國際權威期刊《Journal of Virology，79(5)2839-2846，2005》上報道利用PsV能非特異包裝DNA的特性，將HPV L1、L2基因的質粒與報告基因質粒共轉染哺乳動物細胞，組裝成包裹報告質粒的假病毒顆粒。利用該方法構建的假病毒滴度較高，且試驗操作簡單，結果穩定可靠。因此該HPV假病毒系統目前被廣泛的用于抗HPV疫苗及藥物的篩選與鑒定。此外，HPV轉化的細胞如Hela和Caski等也被用于抗HPV藥物的篩選和藥效學評價。

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，近年來發病率逐年上升，發病年齡漸趨年輕化。研究表明宮頸持續或反復感染人乳頭瘤病毒(HPV)是宮頸上皮內瘤變及宮頸癌的主要危險因素，近年來宮頸HPV感染受到廣泛關注，大量研究證實高危型HPV感染是宮頸癌前病變及宮頸癌發生的重要誘因，嚴重威脅女性的生命健康，預防宮頸癌發生及復發、阻斷病程的關鍵在于清除HPV。HPV是一種無包膜的小DNA病毒，根據其致癌力強弱，分為高危型和低危型。高危型包含HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68等， 主要引起CINⅡ、Ⅲ和宮頸癌。高危型HPV感染宮頸后，病毒DNA隨機整合到宿主細胞基因組DNA上，自身復制的抑制表達性片段E2基因丟失，E6、E7癌基因過度表達，E6、E7原癌蛋白分別與宿主細胞內腫瘤抑制物p53、pRb結合，使腫瘤抑制物失活。原癌基因激活、抑癌基因失活，使宮頸上皮細胞發生惡性轉變。經過多年的臨床研究，已明確HPV感染是宮頸癌及宮頸上皮內瘤變的主要病因。雜交捕獲第二代(HCⅡ)是目前唯一被美國FDA批準的HPV DNA檢測技術，能同時檢出13種HPV高危型，無需基因擴增，陰性預測值高達99％。

對于宮頸HPV的防治，歐美等發達國家將預防性疫苗列入國家常規性接種疫苗，我國也已進入二期臨床試驗，但預防性疫苗無法涵蓋所有高危型HPV型別，且對已感染相關型別的女性沒有治療作用。治療性疫苗用于已感染HPV人群，尚在研制當中，未大規模投入臨床使用。但疫苗的安全性和免疫原性等問題有待提高。物理及手術治療適用于感染HPV病毒且已發生宮頸癌前病變的患者，但手術后仍可能存在持續HPV感染。針對宮頸HPV治療的研究熱點主要集中在抗病毒藥物、免疫增強劑及外用制劑的研制上，并已取得了較大突破,但真正應用于人體臨床試驗時效果卻不盡人意，迄今臨床上仍缺乏行之有效的預防和治療措施。藥物治療宮頸HPV感染常用干擾素如辛復寧(重組人干擾素ɑ2b陰道泡騰膠囊)，理論上通過誘導靶細胞內產生有酶活性的抗病毒蛋白，抑制病毒核酸的復制和轉錄，但其療效和毒副作用仍存在爭議。