[發明專利]銅綠假單胞菌重組蛋白OprL及制備方法和應用

在審

• 申請號: 201610117803.4
• 申請日: 2016-03-02
• 公開（公告）號: CN105732778A
• 公開（公告）日: 2016-07-06
• 發明（設計）人: 章金勇;顧江;鄒全明;楊峰;楊茜;趙莉群;彭六生;吳翼;王逸麟
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第三軍醫大學
• 主分類號: C07K14/21
• 分類號: C07K14/21;C12N15/31;C12N15/70;C12N1/21;A61K39/104;A61P31/04
• 代理公司: 重慶志合專利事務所 50210
• 代理人: 胡榮琿

1.一種重組蛋白，其特征在于：該重組蛋白包含銅綠假單胞菌肽聚糖蛋白片段，所述重組蛋白的核苷酸序列為SEQIDNO：1，氨基酸序列為SEQIDNO：2。

2.一種表達載體，其特征在于：包含編碼權利要求1所述重組蛋白的核苷酸序列。

3.根據權利要求2所述的表達載體，其特征在于：所述表達載體由骨架質粒可修飾地連接編碼上述重組蛋白的核苷酸序列形成；優選地，所述骨架質粒選自pGex系列載體、pET系列載體或pQE系列載體，優選為pGex-6P-2。

4.包含權利要求2-3任一所述表達載體的宿主菌。

5.根據權利要求4所述的宿主菌，其特征在于：所述宿主菌選自大腸桿菌XL1-blue、BL21或HMS174菌株中的一種，優選為大腸桿菌XL1-blue菌株。

6.權利要求1所述的重組蛋白的制備方法，其特征在于，包括：

1)根據編碼銅綠假單胞菌OprL重組蛋白的核酸序列通過全基因合成而得或設計正向引物和反向引物，以銅綠假單胞菌全基因組做模板用PCR擴增得到銅綠假單胞菌重組亞單位疫苗OprL目的基因片段；

2)將步驟1)所得基因片段克隆至表達載體，然后轉化至宿主菌；

3)誘導轉化后的宿主菌表達OprL重組蛋白。

4)OprL重組蛋白的純化。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于：步驟1)所述的正向引物和反向引物的核苷酸序列如SEQIDNO：3和SEQIDNO：4所示。

8.權利要求1所述的重組蛋白在制備用于診斷、預防或治療銅綠假單胞菌的藥物中的應用。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述藥物為用于診斷銅綠假單胞菌的試劑盒。

10.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述藥物為用于預防或治療銅綠假單胞菌的亞單位疫苗。