[發明專利]反映男性精子活力的精漿piRNA標志物或其組合及應用

在審

• 申請號: 201610114615.6
• 申請日: 2016-03-01
• 公開（公告）號: CN105525029A
• 公開（公告）日: 2016-04-27
• 發明（設計）人: 瞿飛;陳熹;洪葉挺
• 申請（專利權）人: 蘇州派安生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及反映男性精子活力的精漿piRNA標志物或其組合及應 用。

背景技術

不孕不育已成為全世界范圍內的生殖健康問題。據不完全統計，目前全世界約有1.86 億人被不孕不育問題困擾，其中由于男性因素造成的不育占據一半左右，且近幾年呈上升 趨勢(1)。近75％的男性不育患者被診斷為先天性自發，然而造成男性不育的分子機制尚不 清晰(2)。目前臨床生殖實驗室檢查項目一般包括對精液的生化檢查，酸性磷酸酶、乳酸脫 氫酶-X等酶類檢查以及精液免疫學檢查，但這些技術都存在一定缺陷，不能直接反映睪丸 的生精功能和全面評價精液質量，也無法解釋造成男性不育的分子機制(3)。弱精癥是男性 不育疾病中的一種，弱精癥是指精液參數中前向運動的精子(a和b級)小于50％或a級運 動的精子小于25％的病癥，弱精子癥又稱精子活力低下。然而臨床上針對這種疾病的檢測很 難精確反映男性精子的活力程度，難以直接判定精子活力的低下程度及其導致的男性不育。 由于精子活力在男性生殖中起到至關重要的作用，所以目前急需尋找一種比現有方法更精 確的方法來直接反映精子活力。

piRNA是2006年在動物生精細胞中發現的一類新型小分子非編碼RNA，因為它們特異 性地與PIWI蛋白質相互作用，所以被命名為PIWI互作RNA(PIWI-interactingRNA)， 簡稱piRNA(4-7)。piRNA與生殖密切相關，這不僅因為piRNA特異性的在生殖世系細胞中 高表達，而且piRNA參與了精子的形成和調控，包括對精子成熟相關基因進行轉錄后調控 以及對逆轉錄轉座子進行抑制等等(4，8)。因此，piRNA突變失去功能后，常常會導致個體 不育(9)。

因此，通過對這些piRNA進行研究，有望發現一些與男性生殖功能(如精子活力等) 密切相關的piRNA，以其作為生物標志物將有望開發出反映男性精子活力的指標，從而應用 于男性生殖功能障礙的臨床診斷、預測和篩查。

發明內容

本發明的目的是篩查反映男性精子活力的精漿piRNA，通過測量精漿piRNA特異性變 化，篩選出精子活力弱的生殖功能障礙的男性的精漿piRNA譜圖，然后通過數學分析方法 計算危險系數評分(RiskScore)以及區分標準(Cut-offValue)，從而給每個病人打分 并評估其危險系數(高危險系數代表精子活力弱并伴隨生殖功能障礙)，最終為精確定量男 性精子活力程度及鑒別因精子活力低下導致的弱精癥提供新的渠道和指標。精漿piRNA作 為新的反映男性精子活力的生物標志物具有重要的指導意義，能顯示出分子水平的遺傳信 息，有助于揭示男性精子活力降低的分子機制。

本發明的上述目的是采用以下技術方案來實現的：

一種與男性精子活力弱及生殖功能障礙相關的piRNA標志物或其組合，包括下列piRNA 中的任意一種或幾種：DQ570956、DQ571813、DQ575659和DQ575661。其中所述的男性生殖 功能障礙選自弱精癥。