[發(fā)明專利]一種促進腸道益生菌增殖的唾液酸化滸苔寡糖制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610110628.6
• 申請日: 2016-02-29
• 公開（公告）號: CN105603023B
• 公開（公告）日: 2019-09-20
• 發(fā)明（設計）人: 趙超;吳一晶;劉斌;李秋哲;楊成鳳;陳玉青
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C12P19/26
• 分類號: C12P19/26;A23L33/125;A61K31/7032;A01P1/00
• 代理公司: 福州元創(chuàng)專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

本發(fā)明公開了一種促進腸道益生菌增殖的唾液酸化滸苔寡糖制備方法。滸苔干燥后超微粉碎，利用乙醇回流提取工藝，得到干燥脫脂的滸苔粉末，經微波輔助提取、脫蛋白及去除多糖和色素后獲得滸苔寡糖，再將唾液酸轉移酶加入到含有滸苔寡糖的反應體系中，進行糖基化反應，制備得到所述的唾液酸化滸苔寡糖，該寡糖能顯著提高腸道益生菌數量，可用于制備改善腸道菌群的藥品或保健品。

技術領域

本發(fā)明屬于保健品技術領域，具體涉及一種促進腸道益生菌增殖的唾液酸化滸苔寡糖及其制備方法。

背景技術

人類腸道中存在巨量不同類型的細菌，腸道內菌群的穩(wěn)定對于保持人類機體健康是必不可少的。益生菌是通過改善腸道微生物平衡從而對宿主施加有益影響的作用，包括抑制病原菌的生長，繁殖改善腸道菌群結構，增強機體免疫功能，以及降低膽固醇和改善血脂等。大多數益生菌來自雙歧桿菌屬和乳桿菌屬，益生菌數量的減少可引起整個腸道菌群失調和腸道微生態(tài)失衡，從而導致許多代謝性疾病的發(fā)生。

唾液酸化寡糖能促進益生菌在腸道上皮定殖、增殖，具有顯著抑制病原菌黏附、維持嬰兒腸道菌群平衡、參加機體免疫等功能。唾液酸化寡糖的合成以核苷糖為糖基供體，乳糖或乙酰乳糖為受體，在唾液酸轉移酶的催化條件下完成。唾液酸糖基轉移酶以胞苷一磷酸-a-N-乙酰神經氨酸為底物將唾液酸殘基轉移至新的糖基受體上形成唾液酸糖苷化合物。滸苔是重要的經濟海藻，在降低膽固醇、降血糖、提高人體免疫力以及抗衰老等方面都有潛在的應用價值。目前，在唾液酸化滸苔寡糖與促進腸道益生菌的研究方面未見到相關專利和報道，本發(fā)明制備的唾液酸化滸苔寡糖對腸道益生菌增殖有明顯促進作用。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是提供一種促進腸道益生菌增殖的唾液酸化滸苔寡糖制備方法。工藝路線簡單，是一種制備功能性寡糖的有效方法，極大提升了綠藻滸苔資源的經濟附加值。經驗證，該唾液酸化滸苔寡糖對腸道益生菌嗜酸乳桿菌和雙歧桿菌增殖有明顯增殖作用。本發(fā)明糖基化滸苔寡糖可應用于益生菌制劑藥物或保健品的制備，所要解決的技術問題是提供一種效果好且利用度高的改善腸道菌群的寡糖。

為實現上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案：

（1）將滸苔干燥后超微粉碎過80-100目篩得干粉末，向滸苔干粉末中加入60-80%乙醇回流提取1-2 h，干粉重量與乙醇體積比（g/mL）為1:20-30，回流結束后回收去除乙醇循環(huán)使用，烘干，粉碎得到干燥脫脂的滸苔粉末；

（2）向步驟（1）制得的脫脂滸苔粉末中加入蒸餾水，其中滸苔質量與蒸餾水體積比（g/mL）為1:20-25，60-70℃萃取溫度下450-600 W微波輔助提取2-3 min，提取結束后，進行過濾，將濾渣重復上述步驟進行2-3次提取，將獲得的濾液混合后進行濃縮，抽濾，濾液減壓濃縮至原體積的3-8%，真空冷凍干燥后粉碎；

（3）向步驟（2）所得粉末中加入蒸餾水，其中粉末質量與蒸餾水體積比為（g/mL）1:10-20，進行攪拌復溶，用Sevag法、三氟三氯乙烷法、三氯乙酸法中一種或幾種除蛋白5-8次；

（4）將步驟（3）所得到的溶液，通過HPD-826大孔吸附樹脂填充柱，洗脫液進一步經過非極性吸附劑活性炭，活性炭使用量與洗脫液按重量體積比（g/mL）1:30-50去除色素，將活性炭與洗脫液于搖床中60-80 r/min振蕩1-2h，6000-8000rpm離心20-30 min，收集上清液；

（5）將步驟（4）得到的上清液旋蒸濃縮至原體積的3-8%，按體積比1:3-4加入質量濃度為95%的乙醇，攪拌后放入4-10℃條件下靜置24 h，6000-8000rpm離心20-30 min，取上清液減壓濃縮、冷凍干燥得滸苔寡糖的固體粉末；