[發明專利]一種鯉皰疹病毒II型的dsRNA及其應用在審
| 申請號: | 201610109702.2 | 申請日: | 2016-02-26 |
| 公開(公告)號: | CN105567693A | 公開(公告)日: | 2016-05-11 |
| 發明(設計)人: | 不公告發明人 | 申請(專利權)人: | 江蘇海健前沿生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/113 | 分類號: | C12N15/113;C12N15/70;A61K48/00;A61K31/713;A61P31/22 |
| 代理公司: | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人: | 耿曉岳 |
| 地址: | 214000 江蘇省*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 皰疹病毒 ii dsrna 及其 應用 | ||
1.一種dsRNA,其特征在于,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一種編碼權利要求1所述dsRNA的DNA。
3.含有權利要求2所述DNA的載體或重組細胞。
4.一種表達權利要求1所述dsRNA的基因工程菌,其特征在于,以Escherichia coliHT115 DE3為宿主,以L4440質粒為表達載體。
5.一種獲得權利要求1所述dsRNA的方法,其特征在于,是通過構建基因工程菌表達SEQID NO.2所示的核苷酸,再從基因工程菌中提取得到所述dsRNA。
6.根據權利要求5所的方法,其特征在于,以Escherichia coli HT115 DE3為宿主。
7.根據權利要求5所的方法,其特征在于,在SEQ ID NO.2所示的核苷酸片段的兩端分別連接T7啟動子,連接L4440質粒后轉化Escherichia coli HT115 DE3菌株,構建得到表達所述dsRNA的基因工程菌。
8.根據權利要求7所的方法,其特征在于,將活化培養后的基因工程菌接種到LB培養基中,37℃、200rpm振蕩培養至OD600=0.5,加入IPTG終濃度至0.5mM,繼續培養6h;采用Trizol法提取菌體總RNA,并使用RNaseA消化掉單鏈RNA。
9.權利要求1所述dsRNA在制備用于治療或預防鯉皰疹病毒II型感染的藥物中的應用。
10.一種疫苗,其特征在于,有效成分包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的dsRNA。
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