[發(fā)明專利]用于治療血管性癡呆的干細(xì)胞制劑及其制備方法和應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610109284.7
• 申請(qǐng)日: 2016-02-28
• 公開（公告）號(hào): CN105749254A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曾憲卓;魯菲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳愛生再生醫(yī)學(xué)科技有限公司
• 主分類號(hào): A61K38/38
• 分類號(hào): A61K38/38;A61P25/28;A61K38/18;A61K35/28;A61K31/7072
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1.一種用于治療血管性癡呆的干細(xì)胞制劑，其特征在于，包括骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、Brdu、表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子和人血白蛋白磷酸緩沖液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療血管性癡呆的干細(xì)胞制劑，其特征在于，所述干細(xì)胞制劑中，所述骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的濃度為(1～3)×10⁶個(gè)/ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于治療血管性癡呆的干細(xì)胞制劑，其特征在于，所述干細(xì)胞制劑中，

Brdu的濃度為5～15μmol/L、

表皮生長(zhǎng)因子的濃度為2～10μg/ml、

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子的濃度為2～20μg/ml，

以及人血白蛋白緩沖液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5～2.0％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療血管性癡呆的干細(xì)胞制劑，其特征在于，所述干細(xì)胞制劑中，

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的濃度為2×10⁶個(gè)/ml、

Brdu的濃度為10μmol/L、

表皮生長(zhǎng)因子的濃度為6μg/ml、

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子的濃度為11μg/ml，

以及人血白蛋白緩沖液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1％。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療血管性癡呆的干細(xì)胞制劑，其特征在于，所述人血白蛋白緩沖液是由人血清白蛋白原液和PBS緩沖液混合制成的。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于治療血管性癡呆的干細(xì)胞制劑，其特征在于，所述人血白蛋白緩沖液中，人血清白蛋白原液和PBS緩沖液的體積比為(0.5～2)：1。

7.一種如權(quán)利要求1～6任一項(xiàng)所述的用于治療血管性癡呆的干細(xì)胞制劑的制備方法，其特征在于，

獲取骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的過程包括以下步驟：

采集骨髓，肝素抗凝，在percoll分離液中離心，取中層單核細(xì)胞，PBS緩沖液離心洗滌，棄上清液，即收獲原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；

將原代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞濃度調(diào)整至1×10⁶～1×10⁸個(gè)/25ml，加入血清培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至融合時(shí)，PBS漂洗，加入胰蛋白酶，見胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，加入含胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基終止消化，按1：2～1：3比例接種進(jìn)行傳代培養(yǎng)至細(xì)胞生長(zhǎng)到融合，繼續(xù)傳代至獲得第3～5代中任一代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，胰酶消化后，離心清洗。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用于治療血管性癡呆的干細(xì)胞制劑的制備方法，其特征在于，所述血清培養(yǎng)基中添加有10^-6～10^-8mol/L的氫化可的松、80-120U/ml的青霉素及80-120mg/ml的鏈霉素。

9.根據(jù)權(quán)利要求1～8任一項(xiàng)所述的干細(xì)胞制劑在制備治療血管性癡呆的藥物中的應(yīng)用。