[發(fā)明專利]一種利用丁基羥基茴香醚促進(jìn)雨生紅球藻生產(chǎn)蝦青素的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610108340.5
• 申請日: 2016-02-27
• 公開（公告）號: CN105648018B
• 公開（公告）日: 2018-05-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 余旭亞;尚敏敏;徐軍偉;李濤;趙鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 昆明理工大學(xué)
• 主分類號: C12P23/00
• 分類號: C12P23/00;C07C403/24;C12R1/89
• 代理公司: 廣州天河萬研知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44418
• 代理人: 劉強(qiáng);陳軒

本發(fā)明公開了一種利用丁基羥基茴香醚促進(jìn)雨生紅球藻生產(chǎn)蝦青素的方法，首先制備雨生紅球藻藻液，雨生紅球藻到對數(shù)生長期后期，此時(shí)細(xì)胞濃度達(dá)到106cells mL?1，用缺氮的BBM培養(yǎng)基稀釋藻液使其濃度達(dá)到2×105cells mL?1，獲得誘導(dǎo)用的藻液；然后用DMSO配成128g L?1的丁基羥基茴香醚母液，將丁基羥基茴香醚母液添加到已經(jīng)稀釋好的誘導(dǎo)藻液中使丁基羥基茴香醚濃度達(dá)到4.95?5.05mgL?1；然后將上述藻液進(jìn)行培養(yǎng)，待藻體細(xì)胞完全變紅后，收集藻細(xì)胞此時(shí)其蝦青素的積累量已達(dá)到最高。本發(fā)明方法簡單可行，成本低廉，并大幅縮短雨生紅球藻變紅的時(shí)間且蝦青素的量有較顯著地提高，從而很大的提高了蝦青素的產(chǎn)率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明具體涉及一種利用丁基羥基茴香醚促進(jìn)雨生紅球藻生產(chǎn)蝦青素的方法，屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

天然蝦青素(3，3′-二羥基-4，4′-二酮基-β，β′-胡蘿卜素)是類胡蘿卜素的最高級衍生物，結(jié)構(gòu)的特殊性決定了其抗氧化活性明顯高于其他類胡蘿卜素。蝦青素作為強(qiáng)抗氧化劑在醫(yī)藥、化妝品和保健品等領(lǐng)域有很大的應(yīng)用，也作為添加劑廣泛用于食品、水產(chǎn)等行業(yè)。

天然蝦青素主要來源于發(fā)夫酵母、鮭魚、蝦殼及雨生紅球藻，其中雨生紅球藻在脅迫條件下，比如高溫、強(qiáng)光照、氮饑餓等，能大量的積累蝦青素，其含量可達(dá)到藻細(xì)胞干重的5-6％，被稱為天然蝦青素的濃縮品。外源誘導(dǎo)子促進(jìn)雨生紅球藻積累蝦青素是提高蝦青素產(chǎn)量的有效手段。丁基羥基茴香醚是一種常見脂溶性抗氧化劑，可作為一種外源誘導(dǎo)子對雨生紅球藻進(jìn)行脅迫培養(yǎng)，激發(fā)植物防御基因的表達(dá)，誘導(dǎo)植物的化學(xué)防御，與機(jī)械損傷和昆蟲取食有相似的效果。因此丁基羥基茴香醚對雨生紅球藻積累蝦青素會(huì)有一定的促進(jìn)作用。

目前國內(nèi)已有多家公司可以大規(guī)?；a(chǎn)蝦青素，也已有了一些相關(guān)的技術(shù)和專利，比如“一種從雨生紅球藻中提取蝦青素的方法”(CN104529852A)公開了一種高效提取蝦青素的方法，主要利用冰醋酸冰浴、勻漿機(jī)勻漿和液氮低溫處理相結(jié)合的方法，大大提高了細(xì)胞破壁率及蝦青素提取率。寧波大學(xué)的“大規(guī)模培養(yǎng)雨生紅球藻和轉(zhuǎn)化蝦青素的裝置及其方法”(CN1966660)，公開了一種雨生紅球藻大規(guī)模培養(yǎng)及蝦青素轉(zhuǎn)化的裝置，包括光生物反應(yīng)器、充氣裝置、培養(yǎng)液灌輸裝置和靜細(xì)胞收集裝置,通過浮沉控制裝置實(shí)現(xiàn)全天候高密度養(yǎng)殖，并將藻的養(yǎng)殖和蝦青素積累結(jié)合在同一反應(yīng)器中完成。天津大學(xué)的“用酵母發(fā)酵殘液培養(yǎng)藻類生產(chǎn)蝦青素的方法”(CN1480524A)，公開了一種利用酵母發(fā)酵殘液生產(chǎn)蝦青素的方法，是向酵母發(fā)酵殘液中加入無機(jī)鹽配成培養(yǎng)基，在特定的容器內(nèi)培養(yǎng)雨生紅球藻或綠球藻，經(jīng)過分離提取蝦青素。上述相關(guān)專利技術(shù)雖然先進(jìn)，但是工藝較為復(fù)雜，設(shè)備要求高，操作較為繁瑣，這就增加了生產(chǎn)的成本和技術(shù)推廣的難度。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題克服現(xiàn)有的缺陷，提供一種利用丁基羥基茴香醚促進(jìn)雨生紅球藻生產(chǎn)蝦青素的方法，可以有效解決背景技術(shù)中的問題。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：

本發(fā)明提供一種利用丁基羥基茴香醚促進(jìn)雨生紅球藻生產(chǎn)蝦青素的方法，包括以下步驟：

步驟1、藻液的制備：培養(yǎng)雨生紅球藻到對數(shù)生長期后期，用缺氮的BBM培養(yǎng)基稀釋藻液并獲得誘導(dǎo)的藻液；

步驟2、誘導(dǎo)雨生紅球藻積累蝦青素：用DMSO配成128g L-1的丁基羥基茴香醚母液，將丁基羥基茴香醚母液添加到已經(jīng)稀釋好的誘導(dǎo)的藻液中使丁基羥基茴香醚濃度達(dá)到2-8mg L-1；然后將上述藻液進(jìn)行培養(yǎng)，待藻體細(xì)胞完全變紅后，收集藻細(xì)胞；

步驟3、利用有機(jī)溶劑提取藻細(xì)胞的蝦青素。