[發明專利]一種利用丁基羥基茴香醚促進雨生紅球藻生產蝦青素的方法

有效

• 申請號: 201610108340.5
• 申請日: 2016-02-27
• 公開（公告）號: CN105648018B
• 公開（公告）日: 2018-05-22
• 發明（設計）人: 余旭亞;尚敏敏;徐軍偉;李濤;趙鵬
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: C12P23/00
• 分類號: C12P23/00;C07C403/24;C12R1/89
• 代理公司: 廣州天河萬研知識產權代理事務所(普通合伙) 44418
• 代理人: 劉強;陳軒

1.一種利用丁基羥基茴香醚促進雨生紅球藻生產蝦青素的方法，包括以下步驟：

步驟1、藻液的制備：培養雨生紅球藻到對數生長期后期，用缺氮的BBM培養基稀釋藻液并獲得誘導的藻液；

步驟2、誘導雨生紅球藻積累蝦青素：用DMSO配成128g L-1的丁基羥基茴香醚母液，將丁基羥基茴香醚母液添加到已經稀釋好的誘導的藻液中使丁基羥基茴香醚濃度達到2-8mgL-1；然后將上述藻液在28℃、光強10000lx、冷光燈連續光照及氮饑餓的復合脅迫下進行培養，待藻體細胞完全變紅后，收集藻細胞；

步驟3、利用有機溶劑提取藻細胞的蝦青素。

2.根據權利要求1所述的利用丁基羥基茴香醚促進雨生紅球藻生產蝦青素的方法，其特征在于，所述雨生紅球藻為雨生紅球藻菌株。

3.根據權利要求1所述的利用丁基羥基茴香醚促進雨生紅球藻生產蝦青素的方法，其特征在于，所述步驟1中藻液的制備具體為：在25℃、光強3000lx，持續光照條件下培養，培養雨生紅球藻到達對數生長期后期，此時細胞濃度達到106cells mL-1，利用缺氮的BBM培養基稀釋到2×105cells mL-1作為誘導藻液。

4.根據權利要求1所述的利用丁基羥基茴香醚促進雨生紅球藻生產蝦青素的方法，其特征在于，所述步驟3中利用有機溶劑提取藻細胞的蝦青素具體為：取5ml上述藻液，4000r/min離心5min，棄上清得藻細胞沉淀；分別向藻細胞沉淀中加入2mL 30％甲醇和5％KOH混合液，60℃水浴15min，4000r/min離心10min，除上清，沉淀加入純水洗滌2次，除堿液殘留；然后加入5mL DMSO，200w超聲破壁15min，其中，超聲1min，10s間歇，于45℃水浴20min，抽提至藻體發白，離心收集上清測OD490；并按照公式計算得出蝦青素的含量，其中C為蝦青素含量，A為490nm下OD值，Va為DMSO體積，Vb為藻液體積。