[發明專利]雷公藤甲素作為特征識別物在鑒別蜂蜜中是否含有雷公藤蜂蜜中的應用

有效

• 申請號: 201610105513.8
• 申請日: 2016-02-25
• 公開（公告）號: CN105758948B
• 公開（公告）日: 2018-02-27
• 發明（設計）人: 薛曉鋒;吳黎明;曹葳蕤;杜冰;張中印;趙柳微;王妙;韓麗妲
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蜜蜂研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司11002
• 代理人: 郝瑞剛

1.以雷公藤甲素作為特征識別物，采用LC-Q-TOF或LC/MS/MS檢測蜂蜜中是否含有雷公藤蜂蜜的方法；

所述LC-Q-TOF中的LC包括如下檢測條件：

色譜柱：C18柱或C8柱或苯基柱；

流動相：A乙腈或甲醇，B 0％-0.2％的甲酸水溶液，梯度洗脫：0-2min 5％B，2-20min 90％B，20-21min 5％B，21-35min 5％B；

所述Q-TOF包括如下檢測條件：

目標離子：361.1646；

碰撞能量30eV；

所述LC/MS/MS中的LC包括如下條件：

色譜柱：C18柱或C8柱或苯基柱；

流動相：A乙腈或甲醇，B 0％-0.2％的甲酸水溶液，梯度洗脫，0-1min 5％B，1-4min 20％B，4-6min 90％B，6-8min 5％B；

MS/MS包括如下條件：

掃描方式：MRM，雷公藤甲素361>143，361>197；倍增電壓：0-400。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述LC-Q-TOF的飛行時間質譜圖中至少含有361.1646±5ppm質量數(M+H)準分子離子峰。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述飛行時間質譜圖中還含有如下質量數(M+H)準分子離子峰中的一個或多個：359.1624±5ppm，307.1820±5ppm，385.1718±5ppm，327.1720±5ppm，355.2032±5ppm，371.1893±5ppm，339.2081±5ppm。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述飛行時間質譜圖中同時含有準分子離子峰：359.1624±5ppm，307.1820±5ppm，385.1718±5ppm，327.1720±5ppm，355.2032±5ppm，371.1893±5ppm，339.2081±5ppm。

5.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，檢測前，采用如下方法對所述蜂蜜樣品進行預處理：取蜂蜜樣品，每1g蜂蜜中加入0.8-1.2mL水溶解，向溶解液中加入0％-0.3％的甲酸乙腈溶液或0％-0.3％的甲酸甲醇溶液渦旋提取1-8min，加入無水硫酸鎂和氯化鈉后離心，取有機相并用氮氣吹干，然后加入40％-60％的乙腈水溶液或40％-60％的甲醇水溶液復溶，過濾即得。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：取蜂蜜樣品，每1g蜂蜜中加入1mL水溶解，向溶解液中加入0％-0.2％的甲酸乙腈溶液或0％-0.2％的甲酸甲醇溶液渦旋提取5min，加入無水硫酸鎂和氯化鈉后離心，取有機相并用氮氣吹干，然后加入50％的乙腈水溶液或50％的甲醇水溶液復溶，過濾即得。

7.根據權利要求1或2或6所述的方法，其特征在于，所述LC-Q-TOF的檢測條件中，所述色譜柱為C18柱。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述色譜柱為Eclipse Plus C18，2.1x100mm，1.8μm。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述LC-Q-TOF中，所述LC還包括如下檢測條件：流速：0.15-0.6mL/min，柱溫：25-35℃，進樣量：1-30μL；

和/或：所述Q-TOF還包括如下檢測條件：

ESI正離子，干燥氣氮氣流速：5-7mL/min，溫度280-320℃，氣簾氣流速：9-11L/min，溫度330-370℃，電力電壓3800-4200V；

MS scan全掃描，質量數范圍100-2000，參比實時校正。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述LC還包括如下檢測條件：流速：0.2mL/min，柱溫：30℃，進樣量：2μL。

11.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述Q-TOF還包括如下檢測條件：ESI正離子，干燥氣氮氣流速：6mL/min，溫度300℃，氣簾氣流速：10L/min，溫度350℃，電離電壓4000V；

MS scan全掃描，質量數范圍100-2000，參比實時校正。