[發明專利]一種煙曲霉素的提取方法

有效

• 申請號: 201610104785.6
• 申請日: 2016-02-25
• 公開（公告）號: CN105622593B
• 公開（公告）日: 2018-06-26
• 發明（設計）人: 薛曉鋒;吳黎明;倪輝;曹葳蕤;杜冰;趙柳微;王妙;張中印
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蜜蜂研究所
• 主分類號: C07D407/04
• 分類號: C07D407/04
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 郝瑞剛

1.一種煙曲霉素的提取方法，包括步驟：

1)將煙曲霉素發酵液的pH值用鹽酸、磷酸、硫酸中的一種調節為1～6.0，用弱極性或非極性大孔樹脂吸附，所用大孔樹脂的孔徑為比表面積為100～1200m²/g，大孔樹脂使用前用乙醇和水活化；所述大孔樹脂的型號為D101，XAD-2，HP-20，SP825，SP850或SP700；

2)吸附后的樹脂置于層析柱中，用質量濃度15～30％的乙醇水溶液清洗；

3)用無水乙醇或質量濃度50～98％的乙醇水溶液洗脫樹脂，洗脫液經濃縮和干燥，得到煙曲霉素粗提品，無水乙醇或乙醇水溶液洗脫樹脂在層析柱中進行，無水乙醇或乙醇水溶液的體積為床層體積的2～4倍。

2.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步驟1)中，將煙曲霉素發酵液的pH值調節為1～6.0，加入大孔樹脂，發酵液和大孔樹脂的體積質量比為15～20mL：1g；攪拌后過濾，過濾得到的樹脂用水清洗。

3.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步驟1)中，將煙曲霉素發酵液離心，分離出上清液，將上清液的pH值調節為1～6.0，活化后的樹脂置于層析柱中，上清液以0.5～3倍床層體積/小時的速度流過層析柱。

4.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述層析柱的高徑比為1～10。

5.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步驟2)中乙醇水溶液以0.5～3倍床層體積/小時的速度流過層析柱。

6.根據權利要求1～5任一所述的提取方法，其特征在于，還包括對煙曲霉素粗提品的通過復溶后，經重新裝填的層析柱進行二次純化：煙曲霉素粗提品按照質量體積比40～50mg：1～2L，用30％的乙醇水溶液溶解，再次經過裝填有大孔樹脂的層析柱用無水乙醇或乙醇水溶液洗脫，洗脫液經避光濃縮和干燥，得到晶體；

晶體按照質量體積比40～50mg：0.1～0.5mL溶于丙酮，加入煙曲霉素粗提品質量的0.5～1倍的環己胺，反應10～15min后冷卻，過濾、揮干丙酮。