[發明專利]用于檢測亞洲型寨卡病毒的熒光RT-PCR引物和熒光探針、試劑盒及檢測方法有效
| 申請號: | 201610099248.7 | 申請日: | 2016-02-23 |
| 公開(公告)號: | CN105506188B | 公開(公告)日: | 2019-09-20 |
| 發明(設計)人: | 黃超杰;朱海;游騰飛;付輝;盧和華 | 申請(專利權)人: | 深圳市易瑞生物技術股份有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 深圳市科吉華烽知識產權事務所(普通合伙) 44248 | 代理人: | 田亞軍;陳本發 |
| 地址: | 518000 廣東省深圳市寶安區西*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 熒光探針 寨卡病毒 檢測 寡核苷酸探針 反向引物 正向引物 試劑盒 熒光 特異性熒光探針 熒光RT-PCR 避免污染 動態監測 后續處理 熒光信號 內封閉 病死 單管 擴增 引物 引入 分析 | ||
1.一種用于檢測亞洲型寨卡病毒的熒光RT-PCR引物和熒光探針,其特征在于:所述用于檢測亞洲型寨卡病毒的熒光RT-PCR引物包括正向引物和反向引物,所述正向引物如SEQID NO:1所示的序列,所述反向引物如SEQ ID NO:2所示的序列;所述熒光探針為寡核苷酸探針,所述寡核苷酸探針如SEQ ID NO:3所示的序列;所述寡核苷酸探針的3’端標記有第一熒光淬滅基團,5’端標記有第一熒光報告基團;所述第一熒光報告基團為FAM、JOE、ROX、TET、TAMRA、HEX、VIC、CY3、CY5或Texas Red中的一種;所述第一熒光淬滅基團為BHQ、TAMRA、Eclipse、Dabcyl、Lowa BlackTM RQ或Lowa BlackTM FQ中的一種。
2.一種用于檢測亞洲型寨卡病毒的試劑盒,其特征在于:所述用于檢測亞洲型寨卡病毒的試劑盒包括RT-PCR反應液,所述RT-PCR反應液包含如權利要求1所述的用于檢測亞洲型寨卡病毒的熒光RT-PCR引物和熒光探針。
3.根據權利要求2所述的用于檢測亞洲型寨卡病毒的試劑盒,其特征在于:所述RT-PCR反應液包括內標引物和內標探針,所述內標引物包括內標正向引物和內標反向引物,所述內標正向引物如SEQ ID NO:4所示的序列,所述內標反向引物如SEQ ID NO:5所示的序列,所述內標探針如SEQ ID NO:6所示的序列,其中,所述內標探針的5’端標記有第二熒光報告基團,3’端標記有第二熒光淬滅基團。
4.根據權利要求3所述的用于檢測亞洲型寨卡病毒的試劑盒,其特征在于:所述第二熒光報告基團為HEX;所述第二熒光淬滅基團為BHQ1,所述第二熒光報告基團與第一熒光報告基團為不同的基團。
5.根據權利要求4所述的用于檢測亞洲型寨卡病毒的試劑盒,其特征在于:所述用于檢測亞洲型寨卡病毒的試劑盒還包括酶混合液、內標溶液、陽性質控品、陰性質控品;
所述陽性質控品為含有如SEQ ID NO:7所示序列的pUC57載體質粒;所述陰性質控品為無菌TE緩沖液;所述內標溶液為含有如SEQ ID NO:8所示序列的假病毒顆粒的溶液。
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