[發明專利]一種發酵生產桿菌肽的方法

無效

• 申請號: 201610097983.4
• 申請日: 2016-02-23
• 公開（公告）號: CN105483064A
• 公開（公告）日: 2016-04-13
• 發明（設計）人: 任風芝;張雪霞;王耀耀;耿文飛;鄭智慧;楊海靜;高任龍;段寶玲;張煒
• 申請（專利權）人: 華北制藥集團新藥研究開發有限責任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P21/00;C12R1/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種發酵生產桿菌肽的方法，包括以下步驟：

a、制備地衣芽孢桿菌菌株的種子液

將地衣芽孢桿菌菌株的斜面培養物接種于種子培養基，28-30℃、200-240rpm，培養 20-28h獲得種子液；

其中所述的種子培養基按以下方法制得：玉米淀粉3.0-5.0克、葡萄糖10.0-20.0克、酵 母粉10.0-20.0克、硫酸銨1.0-2.0克、氯化鈉1.0-2.0克、七水硫酸鎂1.0-1.5克，加水定容 至1000mL，pH6.5-7.0，121℃滅菌30min；

b、制備地衣芽孢桿菌菌株的發酵液

將上述種子液以體積百分比6-10%的接種量接種于發酵培養基，在搖瓶或發酵罐中發 酵，發酵時間72-96h，發酵溫度28-30℃，得到發酵液；

其中所述發酵培養基按以下方法制得：玉米淀粉30.0-40.0克、葡萄糖10.0-20.0克、棉 籽蛋白粉15.0-30.0克、酵母粉10.0-20.0克、硫酸銨2.0-3.0克、玉米漿3.0-5.0克、磷酸二 氫鉀1.0-1.5克、氯化鈉2.0-3.0克、七水硫酸鎂1.0-2.0克，加水定容至1000mL，pH6.5-7.0， 121℃滅菌30mi。

2.根據權利要求1所述的方法，步驟b中所述棉籽蛋白粉和酵母粉加入比例為3：2。

3.根據權利要求1或2所述的方法，步驟b中發酵15-25小時之間添加經過滅菌后的超順 磁性微球。

4.根據權利要求1所述的方法，步驟b中所述發酵壓力為0.05±0.01Mpa、攪拌速度為 300-400rpm，通氣比為1:0.8-1.2vvm。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述超順磁性微球的粒徑為10-30um，粒徑 分布為單分散，表面的功能基團為羧基基團。

6.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，每升發酵液添加10-20g所述超順磁性微 球。