[發明專利]克百威生物條形碼免疫分析測定試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 201610086751.9
• 申請日: 2016-02-16
• 公開（公告）號: CN105699650B
• 公開（公告）日: 2018-09-07
• 發明（設計）人: 金茂俊;王靜;杜鵬飛;金芬;邵華;佘永新;鄭鷺飛;王珊珊
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/532
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 欒波

本發明涉及食品安全檢測免疫分析技術領域，具體而言，涉及一種克百威生物條形碼免疫分析測定試劑盒，所述試劑盒包括盒體，所述盒體內包含有：克百威標準品、克百威磁性納米探針、單標膠體金納米探針、克百威雙標膠體金納米探針、DNA生物芯片、銀染試劑。本申請提供的試劑盒可以簡便、快速、靈敏、特異、穩定地檢測待測樣品中的克百威含量，實驗重現性好，便于操作和生產。

技術領域

本發明涉及食品安全檢測免疫分析技術領域，具體而言，涉及一種克百威生物條形碼免疫分析測定試劑盒及其應用。

背景技術

克百威為不可逆膽堿酯酶抑制劑，對人、畜禽、魚、鳥等毒性極高，一般加工成顆粒劑或種衣劑進行土壤或種子處理。藥劑在土壤中殘效期長，植物能通過根、莖、葉或種子吸收傳導，在葉緣積累較多，誤食染藥植物可能引起中毒。土壤中的克百威還可能通過涇流和滲透污染地面和地下水源。因此，建立高效快速的克百威檢測技術，對于環境和農副產品中克百威殘留的監測及克百威中毒的準確快速診斷和有效治療，保障人類健康具有重要意義。

免疫分析方法的作用和地位目前已得到國內外學者的廣泛認可，免疫分析方法的研究也是檢測方法研究最熱門的領域之一。在免疫分析方法領域中，我國在酶聯免疫分析方法方面開展了較為深入的研究，包括半抗原合成、抗體制備、標記物偶聯、反應體系中各種理化性質對免疫分析方法的影響及半抗原結構與其所制備得到抗體之間的構效關系等方面。近年來，我國學者在熒光免疫分析、化學發光免疫分析、生物傳感器和生物條形碼免疫分析方法方面也開展了較多的研究工作。

基于磁性納米粒子的生物條形碼免疫分析方法，利用生物條形碼信號放大作用及磁性納米粒子的分離富集作用，其最低檢出限相對于ELISA方法提高了幾個數量級，致使其從誕生以來，便獲得了科學界的高度關注。生物條形碼指的是可結合在納米粒子上的大量相同序列的DNA片段。該方法最早是用于對前列腺特異性抗原(Prosta tespec if icAntigen，PSA)的檢測。該方法主要包括：磁性納米粒子表面修飾PSA單克隆抗體，膠體金納米探針表面修飾起信號放大作用的生物條形碼和針對PSA的另一種抗體。在PSA存在時，磁性納米粒子、PSA、膠體金納米探針通過抗原抗體反應形成“三明治”夾心復合結構。形成的復合物經磁場分離，富集的磁性納米探針通過高溫低鹽法變性，釋放生物條形碼，通過檢測解離下來的生物條形碼含量便可以間接得到PSA的含量。

生物條形碼分析方法近十年來在痕量蛋白質和核酸檢測方法得到了快速的發展，通過與免疫反應相結合建立的生物條形碼免疫分析方法，將免疫分析方法的檢測限提高到了一個新的高度。然而該方法建立至今，只能通過構建“三明治”結構模式實現對蛋白質等大分子物質的檢測。由于克百威為小分子化合物，只有一個抗原結合位點，因此目前生物條形碼免疫分析方法采用的“三明治”結構模式基本不能適用于克百威的檢測。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的目的在于提供一種克百威生物條形碼免疫分析測定試劑盒，使用該試劑盒可以特異地定量檢測水中或食品中克百威含量。該試劑盒通過競爭反應體系進行檢測，克服了目前生物條形碼免疫分析方法采用的“三明治”結構模式基本不能適用于克百威的檢測的缺陷。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

一種克百威生物條形碼免疫分析測定試劑盒，所述試劑盒包括盒體，所述盒體內包含有：

克百威標準品、克百威磁性納米探針、單標膠體金納米探針、克百威雙標膠體金納米探針、DNA生物芯片、銀染試劑。

克百威(Carbofuran)分子式：C12H15NO3；CAS號：1563-66-2。