[發(fā)明專利]一種發(fā)酵提取葛根黃酮的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610083303.3
• 申請日: 2016-02-06
• 公開（公告）號: CN105663223A
• 公開（公告）日: 2016-06-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄒潮;房小龍
• 申請（專利權(quán)）人: 尤麗康（江蘇）生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類號: A61K36/488
• 分類號: A61K36/488;A61K125/00
• 代理公司: 連云港潤知專利代理事務(wù)所 32255
• 代理人: 劉喜蓮

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物活性成分的提取方法，特別是一種發(fā)酵提取葛根黃酮的方法。

背景技術(shù)

葛根為豆科多年生落葉藤本植物葛的干燥根，屬于衛(wèi)生部公布的既是食品又是藥 品的物品。葛根的主要有效成分為葛根素、大豆素、大豆苷等異黃酮類化合物。黃酮在體 內(nèi)參與磷酸與花生四烯酸的代謝、蛋白質(zhì)的磷酸化、鈣離子的轉(zhuǎn)移、自由基的清除等作用， 對治療心腦血管疾病、抗癌、舒張平滑肌、改善血液循環(huán)、解酒及解毒等有直接或間接作用。 葛根黃酮是一種天然來源的生物黃酮，分子量小，能被人體迅速吸收，能通過血腦屏障，其 應(yīng)用前景被市場看好。葛根平均黃酮含量約2%，其中葛皮中黃酮含量約3%，淀粉含量約7%， 葛肉中黃酮含量約1.2%，淀粉含量約70%。因此，如何提高葛根黃酮提取率一直是本行業(yè)的 關(guān)注的技術(shù)問題。現(xiàn)有的葛根黃酮的提取方法主要有：水提法、醇回流法、醇滲漉法、超聲輔 助提取取法、微波輔助提取法等。水提法雖然方便但得率低；醇回流法和醇滲漉法雖然可提 高得率但需使用大量有機(jī)溶劑，對環(huán)境和人體都有一定危害，大規(guī)模生產(chǎn)時需增加成本來 回收和處理有機(jī)溶劑；超聲輔助和微波輔助提取法不使用有機(jī)溶劑而且也能夠提高得率， 但是使用的設(shè)備昂貴，并且大設(shè)備生產(chǎn)噪音大，有害操作者的健康。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種不使用有機(jī)溶劑， 工藝設(shè)計合理，黃酮得率更高的發(fā)酵提取葛根黃酮的方法。

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下的技術(shù)方案來實現(xiàn)的。本發(fā)明是一種發(fā)酵 提取葛根黃酮的方法，其特點是，包括如下步驟：

（1）原料處理：用純凈水清洗葛根原料，瀝干后投入勻漿機(jī)按料水質(zhì)量比1:4-15加水勻 漿，得到葛根勻漿液；

（2）酶解：向所述葛根勻漿液加入占其質(zhì)量0.1-1%的淀粉酶，在酶解pH5-7，酶解溫度 37-45℃下酶解4-16h，得到葛根酶解液；

（3）發(fā)酵浸提：向所述葛根酶解液中添加0.1×10⁹-1×10⁹CFU/L的發(fā)酵劑，在37-40℃ 下發(fā)酵浸提至料液pH值達(dá)到3-4，得到發(fā)酵浸提液；

所述發(fā)酵劑是由保加利亞乳桿菌、干酪乳桿菌、嗜熱鏈球菌、雙歧桿菌、植物乳桿菌、鼠 李糖乳桿菌、嗜酸乳桿菌中的兩種或三種構(gòu)成的組合菌種；

（4）過濾：將所述發(fā)酵浸提液過濾處理，得到葛根黃酮提取液。

本發(fā)明方法得到的葛根黃酮提取液可直接用于配制口服液，也可供后續(xù)純化葛根 異黃酮。

本發(fā)明所述的一種發(fā)酵提取葛根黃酮的方法中，進(jìn)一步優(yōu)選的技術(shù)方案或者技術(shù) 特征是：

1、在步驟（1）中：勻漿時葛根原料與水的質(zhì)量比為1:5。

2、在步驟（2）中：所述淀粉酶的添加量為所述葛根勻漿液質(zhì)量的0.3%。

3、在步驟（2）中：所述酶解pH為5.8，酶解溫度為45℃，酶解時間為4h。

4、在步驟（2）中：在添加淀粉酶的同時，再添加占所述葛根勻漿液質(zhì)量0.1-1%的纖 維素酶。

5、在步驟（2）中：所述纖維素酶的添加量為所述葛根勻漿液質(zhì)量的0.2%。

6、在步驟（3）中：向所述葛根酶解液中添加1×10⁹CFU/L的發(fā)酵劑。

7、在步驟（3）中：所述發(fā)酵劑為質(zhì)量比為保加利亞乳桿菌：干酪乳桿菌：嗜熱鏈球 菌=2:1.5:1，或質(zhì)量比為雙歧桿菌：植物乳桿菌：鼠李糖乳桿菌=2:2:1，或質(zhì)量比為鼠李糖 乳桿菌：嗜酸乳桿菌=2:1的組合菌種。

8、在步驟（3）中：在添加所述發(fā)酵劑的同時，再添加占所述葛根酶解液質(zhì)量1-20% 的葡萄糖。

9、在步驟（3）中：所述葡萄糖的添加量為所述葛根酶解液質(zhì)量的15%。

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題還可以通過以下的技術(shù)方案來進(jìn)一步實現(xiàn)。本發(fā)明還 提供了另一種發(fā)酵提取葛根黃酮的方法，其特點是，包括如下步驟：

（1）原料處理：用純凈水清洗葛根原料，瀝干后投入勻漿機(jī)按料水質(zhì)量比1:4-15加水勻 漿，得到葛根勻漿液；

（2）酶解—發(fā)酵浸提：向所述葛根勻漿液同時添加占其質(zhì)量0.1-1%的淀粉酶及添加量 為0.1×10⁹-1×10⁹CFU/L的發(fā)酵劑，在37-40℃下同時進(jìn)行酶解和發(fā)酵浸提，至料液pH值達(dá) 到3-4，得到發(fā)酵浸提液；