[發明專利]一種高純度灰樹花多酚組分的制備方法

有效

• 申請號: 201610082919.9
• 申請日: 2016-02-06
• 公開（公告）號: CN105732250B
• 公開（公告）日: 2018-03-09
• 發明（設計）人: 呂旭聰;劉斌;賈瑞博;李燕;周文斌;陳竟豪;林占熺
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C07B63/00
• 分類號: C07B63/00;C07D493/06;C07D311/30;C07D311/40;C07D311/62;C07H13/08;C07H17/07;C07H1/06;C07C37/82;C07C39/08;C07C51/47;C07C59/52;C07C59/64
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種高純度灰樹花多酚組分的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）預處理：將灰樹花子實體干制品粉碎成粉末，過40～80目篩備用；

（2）浸提：取灰樹花粉末加入蒸餾水中，利用超聲波輔助提取技術浸提2-4次，合并提取液，經板框過濾去除殘渣；

（3）膜過濾：通過膜過濾裝置進行過濾，截留蛋白及多糖，獲得的濾液經濃縮、干燥后獲得灰樹花多酚粗提物；

（4）分離純化：將灰樹花多酚粗提物復溶于去離子水中，采用柱層析-制備型高效液相色譜串聯分離純化技術進行分離純化；

所述的超聲輔助浸提的條件為：以水為提取溶劑，料液重量比為1：10-1：50，超聲溫度30-70℃，超聲時間30-90 min，超聲功率100-400w；

所述的過濾膜為截留分子量為5 kD的超濾膜，濾液所采用的干燥方法為真空冷凍干燥或離心噴霧干燥；

所述的柱層析的填料為：NKA-Ⅱ型大孔吸附樹脂，上樣速度3 BV/h，吸附時間2 h，洗脫溶劑為20%-60%乙醇溶液，洗脫速度3 BV/h；經吸附、洗脫收集洗脫液，減壓濃縮至干得粗品，以50%甲醇復溶后經0.45 μm濾膜過濾；

制備型反相C18色譜柱，色譜柱規格：內徑20 mm、長度250 mm、C18硅膠填料粒徑5 μm，檢測波長280nm，進樣量1 mL，流速5-10 mL/min，柱溫30℃，采用 A:甲醇-B: 0.1%甲酸進行線性梯度洗脫，洗脫程序為：

（1）0～30 min：A: 5%+B: 95%→A: 60%+B: 40%；

（2）30～35 min：A: 60%+B: 40%→A: 5%+B: 95%；

（3）35～45 min：A: 5%+B: 95%。

2. 根據權利要求1所述的一種高純度灰樹花多酚組分的制備方法，其特征在于：NKA-Ⅱ型大孔吸附樹脂柱層析分離物進一步經過制備型高效液相色譜純化，根據紫外檢測器譜圖分別收集灰樹花多酚組分進行結晶操作，得到17種高純度多酚組分：鞣花酸、槲皮素、 4-羥基苯甲酸、沒食子酸-3-O-(6`-O-沒食子酰)葡萄糖苷、咖啡酰酒石酸、咖啡酸、表兒茶素沒食子酸酯、5,6,7,3',4'-五甲氧基黃酮、對香豆酰奎尼酸、間雙沒食子酸、去氫二阿魏酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷、3,4,5-三甲氧基苯甲酸、5-十九烷基間苯二酚、阿魏酸、對香豆酰基蘋果酸以及對香豆酰基酒石酸，純度均大于95%。