[發(fā)明專利]一種藥物組合物的檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610081226.8
• 申請(qǐng)日: 2016-02-04
• 公開（公告）號(hào): CN107037137A
• 公開（公告）日: 2017-08-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 柯瀟;陳海燕;楊宋琪;羅旭
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川濟(jì)生堂藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種藥物組合物的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

貫葉金絲桃已經(jīng)有2400年的使用歷史，近年來對(duì)貫葉金絲桃的研究熱點(diǎn)放在抗抑郁功效方面含有多種具生物活性的化學(xué)成分，其中主要是苯并二蒽酮類化合物、金絲桃素和偽金絲桃素；多種蘆丁、金絲桃苷、異槲皮苷、槲皮素、間苯三酚類化合物等；其中以蘆丁、金絲桃苷、異槲皮苷、槲皮素為主要化合物。現(xiàn)代藥理證明，蘆丁、金絲桃苷、異槲皮苷、槲皮素等均對(duì)在小鼠FST中均表現(xiàn)出明顯的抗抑郁活性，是貫葉金絲桃抗抑郁癥的主要活性成分。

舒肝解郁膠囊是由貫葉金絲桃和刺五加為原料，采用現(xiàn)代制藥工藝制備而成的中成藥，具有疏肝解郁、健脾安神的功效，臨床常用于輕、中度抑郁癥屬肝郁脾虛證者，癥見情緒低落、興趣下遲滯、入睡困難、早醒、多夢(mèng)、緊張不安、急躁易怒、食少納呆、胸悶、疲乏無力、多汗、疼痛、舌苔白或膩，脈弦或細(xì)。由于舒肝解郁膠囊同時(shí)包含了貫葉金絲桃和刺五加兩種藥材的多種化學(xué)成分，包括：金絲桃苷、蘆丁、槲皮素、槲皮苷、異槲皮苷、刺五加苷E、紫丁香苷及異嗪皮啶等，在定性和定量檢測(cè)中常常互相干擾，同時(shí)由于貫葉金絲桃提取物中主要活性物質(zhì)金絲桃苷、蘆丁、異槲皮苷、槲皮素母核結(jié)構(gòu)相同、性質(zhì)相似，要利用HPLC方法準(zhǔn)確將目標(biāo)物質(zhì)同其他雜質(zhì)有效分離并且定量分析存在較大難度，成方制劑的質(zhì)量控制更為困難。

《中國藥典(2015版)》和韓林等所介紹的高效液相色譜檢測(cè)方法[金絲桃苷含量的RP-HPLC法測(cè)定，時(shí)珍國醫(yī)國藥2012年第23卷第10期]均無法檢測(cè)出槲皮素；例如錢秋霞等所報(bào)道的方法[錢秋霞等，HPLC法測(cè)定不同干燥方法的貫葉連翹中黃酮類化合物的含量，中草藥,2001，32,5]其分離度達(dá)不到分離要求(分離度一般要求大于1.5)，其主要物質(zhì)峰中還包含大量雜質(zhì)。因此，建立一種簡(jiǎn)單、有效、靈敏度高的多成分高效液相色譜檢測(cè)方法，對(duì)于貫葉金絲桃及含有貫葉金絲桃的成方制劑的質(zhì)量控制和檢測(cè)來說具有十分重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明解決的技術(shù)問題之一是針對(duì)含有貫葉金絲桃的藥物組合物，如何快速、有效且能準(zhǔn)確的檢測(cè)有效成分，從而更好的控制藥物組合物質(zhì)量，為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了下述技術(shù)方案：

本發(fā)明一方面提供一種藥物組合物檢測(cè)方法，該方法包括以下步驟：取適量藥物組合物制備成供試品溶液，利用液相色譜法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，其中所述液相色譜的色譜條件為：色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；流動(dòng)相A為乙腈，流動(dòng)相B為0.1％磷酸溶液，檢測(cè)波長為360nm，采用梯度洗脫；其中所述藥物組合物為含有貫葉金絲桃提取物的藥物組合物。

本發(fā)明提供的藥物組合物的檢測(cè)方法，其所述的梯度洗脫條件優(yōu)選為：

本發(fā)明提供的藥物組合物的檢測(cè)方法，其中所述液相色譜檢測(cè)條件中，柱溫優(yōu)選為30-35℃，更優(yōu)選為30℃；流速優(yōu)選為0.8-1.2ml/min，更優(yōu)選為1.0ml/min。

本發(fā)明提供的藥物組合物的檢測(cè)方法，其中所述供試品溶液的制備方法優(yōu)選為，取適量藥物組合物，用含醇溶液溶解，提取，過濾，即得；其中所述含醇溶液為含有60％或以上的甲醇或乙醇的溶液；更優(yōu)選為60％乙醇溶液；所述提取方法優(yōu)選為超聲提取。

上述供試品溶液的制備方法優(yōu)選含有如下步驟：取藥物組合物適量，研細(xì)，稱取約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，密塞，精密加入60％乙醇25ml，稱定重量，超聲提取，放冷，再稱定重量，用60％乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

上述含貫葉金絲桃的藥物組合物中活性成分優(yōu)選為貫葉金絲桃和刺五加制備而成；更優(yōu)選為舒肝解郁膠囊。

本發(fā)明所使用的色譜柱為常規(guī)的以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱，如C18(2)5um 250x 4.6mm、SHI MaDzu VP-ODS(250×4.6mm,5μm)、AgilentC18(250×4.6mm,5μm)、Phenomenex Luna C18(250×4.6mm,5μm)、Phenomenex Luna C18(150×4.6mm,5μm)等；以規(guī)格為250×4.6mm,5μm效果更優(yōu)。

本發(fā)明通過考察二極管陣列檢測(cè)器(DAD檢測(cè)器檢測(cè))檢測(cè)含有貫葉金絲桃提取物的藥物組合物(如舒肝解郁膠囊內(nèi)容物)時(shí)，獲知吸收波長在254nm、300nm和360nm附近均出現(xiàn)吸收峰值，其中檢測(cè)波長為254nm時(shí)，梯度基線漂移大；檢測(cè)波長為300nm時(shí)，各目標(biāo)物質(zhì)峰的吸收度較小；檢測(cè)波長為360nm時(shí)，背景以及其它雜峰干擾小，且出峰結(jié)果穩(wěn)定，檢測(cè)效果最佳。