[發明專利]艱難梭菌毒素A/B的熒光定量PCR檢測試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 201610080808.4
• 申請日: 2016-02-04
• 公開（公告）號: CN105525023A
• 公開（公告）日: 2016-04-27
• 發明（設計）人: 羅寶花;曾宏彬;陳杰
• 申請（專利權）人: 廣州賽哲生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 郝傳鑫;宋靜娜

1.一種檢測艱難梭菌的引物對，其特征在于：所述引物對的上游引物具有 如SEQIDNO：1所示的序列，所述引物對的下游引物具有如SEQIDNO：2所 示的序列。

2.一種檢測艱難梭菌毒素A的引物對，其特征在于：所述引物對的上游引 物具有如SEQIDNO：3所示的序列，所述引物對的下游引物具有如SEQIDNO： 4所示的序列。

3.一種檢測艱難梭菌毒素A的寡核苷酸探針，其特征在于：所述探針具有 如SEQIDNO：5所示的序列或其互補序列。

4.根據權利要求3所述的檢測艱難梭菌毒素A的寡核苷酸探針，其特征在 于：在寡核苷酸的5＇末端結合有熒光物質，在3＇末端結合有淬滅物質。

5.根據權利要求4所述的檢測艱難梭菌毒素A的寡核苷酸探針，其特征在 于：所述熒光物質為FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX中的至少一種；所 述淬滅物質為TAMRA、BHQ1、BHQ2、BHQ3、DABCYL中的至少一種。

6.一種檢測艱難梭菌毒素A的寡核苷酸組，其特征在于：其具有權利要求 2所述的檢測艱難梭菌毒素A的引物對和權利要求3所述的檢測艱難梭菌毒素A 的寡核苷酸探針。

7.一種檢測艱難梭菌毒素B的引物對，其特征在于：所述引物對的上游引 物具有如SEQIDNO：6所示的序列，所述引物對的下游引物具有如SEQIDNO： 7所示的序列。

8.一種檢測艱難梭菌毒素B的寡核苷酸探針，其特征在于：所述探針具有 如SEQIDNO：8所示的序列或其互補序列。

9.根據權利要求8所述的檢測艱難梭菌毒素B的寡核苷酸探針，其特征在 于：在寡核苷酸的5＇末端結合有熒光物質，在3＇末端結合有淬滅物質。

10.根據權利要求9所述的檢測艱難梭菌毒素B的寡核苷酸探針，其特征 在于：所述熒光物質為FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX中的至少一種； 所述淬滅物質為TAMRA、BHQ1、BHQ2、BHQ3、DABCYL中的至少一種。

11.一種檢測艱難梭菌毒素B的寡核苷酸組，其特征在于：其具有權利要 求7所述的檢測艱難梭菌毒素B的引物對和權利要求8所述的檢測艱難梭菌毒 素B的寡核苷酸探針。

12.一種特異性擴增艱難梭菌毒素A基因的引物對，其特征在于：其具有 外側引物對和內側引物對；

所述外側引物對的上游引物具有如SEQIDNO：9所示的序列，所述引物對 的下游引物具有如SEQIDNO：10所示的序列；

所述內側引物對的上游引物具有如SEQIDNO：11所示的序列，所述引物 對的下游引物具有如SEQIDNO：12所示的序列。

13.一種特異性擴增艱難梭菌毒素B基因的引物對，其特征在于：其具有 外側引物對和內側引物對；

所述外側引物對的上游引物具有如SEQIDNO：13所示的序列，所述引物 對的下游引物具有如SEQIDNO：14所示的序列；

所述內側引物對的上游引物具有如SEQIDNO：15所示的序列，所述引物 對的下游引物具有如SEQIDNO：16所示的序列。

14.一種艱難梭菌毒素A/B的探針法熒光定量PCR檢測試劑盒，其特征 在于：其包括權利要求6所述的檢測艱難梭菌毒素A的寡核苷酸組和權利要求 11所述的檢測艱難梭菌毒素B的寡核苷酸組。

15.如權利要求14所述的艱難梭菌毒素A/B的探針法熒光定量PCR檢測 試劑盒，其特征在于：其還包括權利要求1所述的檢測艱難梭菌的引物對。

16.如權利要求14所述的艱難梭菌毒素A/B的探針法熒光定量PCR檢測 試劑盒，其特征在于：其還包括艱難梭菌毒素A和艱難梭菌毒素B的陽性質控 品，所述艱難梭菌毒素A的陽性質控品具有如SEQIDNO：17所示的序列，所 述艱難梭菌毒素B的陽性質控品具有如SEQIDNO：18所示的序列。