[發(fā)明專利]一種霍亂弧菌多重熒光PCR檢測試劑盒及其制備與應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610080203.5 | 申請日： | 2016-02-04 |
| 公開（公告）號： | CN105603091B | 公開（公告）日： | 2019-05-28 |
| 發(fā)明（設計）人： | 柯昌文;李柏生;柯碧霞;肖紅;邵俊斌;朱勤瑋;王凱;熊磊;李鴻雁 | 申請（專利權）人： | 廣東省疾病預防控制中心;杭州博康生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 上海光華專利事務所(普通合伙) 31219 | 代理人： | 郭婧婧;許亦琳 |
| 地址： | 511430 廣東省*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 霍亂弧菌 多重 熒光 pcr 檢測 試劑盒 及其 制備 應用 | ||
1.一種霍亂弧菌多重熒光PCR檢測試劑盒，所述試劑盒中包括霍亂弧菌溶血素基因檢測引物及探針、霍亂弧菌O1群抗原基因檢測引物及探針、霍亂弧菌O139群抗原基因檢測引物及探針、霍亂弧菌腸毒素基因檢測引物及探針，所述霍亂弧菌溶血素基因檢測引物由核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的下游引物組成，霍亂弧菌溶血素基因檢測探針的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述霍亂弧菌O1群抗原基因檢測引物由核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ IDNO.5所示的下游引物組成，所述霍亂弧菌O1群抗原基因檢測探針的核苷酸序列如SEQ IDNO.6所示；所述霍亂弧菌O139群抗原基因檢測引物由核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示的下游引物組成，所述霍亂弧菌O139群抗原基因檢測探針的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；所述霍亂弧菌腸毒素基因檢測引物由核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示的下游引物組成，所述霍亂弧菌腸毒素基因檢測探針的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示；所述霍亂弧菌溶血素基因檢測探針、霍亂弧菌O1群抗原基因檢測探針、霍亂弧菌O139群抗原基因檢測探針和霍亂弧菌腸毒素基因檢測探針的5’端標記有熒光報告基團，3’端標記有熒光淬滅基團。
2.根據(jù)權利要求1所述的霍亂弧菌多重熒光PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述霍亂弧菌溶血素基因檢測探針5’端標記的熒光報告基團為FAM熒光基團，3’端標記的熒光淬滅基團為BHQ-1。
3.根據(jù)權利要求1所述的霍亂弧菌多重熒光PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述霍亂弧菌O1群抗原基因檢測探針5’端標記的熒光報告基團為CY5熒光基團，3’端標記的熒光淬滅基團為BHQ-3。
4.根據(jù)權利要求1所述的霍亂弧菌多重熒光PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述霍亂弧菌O139群抗原基因檢測探針5’端標記的熒光報告基團為HEX熒光基團，3’端標記的熒光淬滅基團為BHQ-1。
5.根據(jù)權利要求1所述的霍亂弧菌多重熒光PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述霍亂弧菌腸毒素基因檢測探針5’端標記的熒光報告基團為Cal Red 610熒光基團，3’端標記的熒光淬滅基團為BHQ-2。
6.根據(jù)權利要求1所述的霍亂弧菌多重熒光PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還含有dNTP、MgCl2、PCR緩沖液、Taq DNA聚合酶、無菌水。
7.根據(jù)權利要求1所述的霍亂弧菌多重熒光PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還含有陽性對照或陰性對照中的一種或多種。
8.如權利要求1～7任一權利要求所述的霍亂弧菌多重熒光PCR檢測試劑盒在制備霍亂弧菌檢測產(chǎn)品中的用途。
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