[發明專利]一種曲馬多檢測抗原及其制備方法

有效

• 申請號: 201610079188.2
• 申請日: 2016-02-04
• 公開（公告）號: CN105622748B
• 公開（公告）日: 2019-04-23
• 發明（設計）人: 凌世生
• 申請（專利權）人: 杭州旭科生物技術有限公司
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;C07K14/77;C07K14/435;C07K1/02
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司 33100
• 代理人: 黃素萍;徐關壽

本發明涉及一種曲馬多檢測抗原，其結構通式如下：其中，m＝1，2，3，4，5。以及曲馬多檢測抗原的制備方法，以曲馬多為原料，首先將曲馬多苯環上O位去甲基，然后通過溴丁酸乙酯在O?去甲曲馬多的O位上引出羧基，再脫去乙酯，通過羧基與大分子蛋白偶聯。本發明的合成制備工藝中所使用的材料和催化劑均為普通產品，因此更具實用性，適于工業生產并能產生經濟價值；本發明沒有用到氯仿，毒性較低，更具有安全性。

技術領域

本發明涉及免疫檢測技術領域；具體涉及利用化學合成方法從曲馬多開始合成去甲曲馬多及其衍生物，再與大分子蛋白偶聯制成曲馬多檢測抗原的制備方法。

背景技術

下面的背景技術用于幫助讀者理解本發明，而不能被認為是現有技術。

曲馬多(Tramadol)是一種非阿片類中樞性鎮痛藥，對μ-阿片類受體的親和力相當于嗎啡的1/6000對κ和δ受體的親和力僅為μ受體的1/25。鹽酸曲馬多由德國格蘭泰公司研制開發，于1977年首先在德國上市，目前已在包括我國在內的許多國家上市，得到了廣泛的臨床應用。曲馬多可口服給藥、直腸內給藥、肌肉注射或靜脈緩慢注射，或稀釋后靜脈內滴注。曲馬多主要作用于中樞神經系統，用藥過量會產生依賴，對人體的作用類似嗎啡和海洛因。曲馬多可用于治療中等至嚴重的疼痛。有研究表明，曲馬多對去甲腎上腺素和血清張力素系統的作用以及減輕痛感的作用，可以減輕抑郁癥和焦慮癥的痛苦。

作為目前唯一一種非阿片類中樞性鎮痛藥，由于其鎮痛效果強大而成癮性低故而在臨床上得到廣泛使用。多見用于各種術后止痛、癌痛、分娩痛等的治療，隨著對其研究的深入，在抗寒戰、止咳及其他一些治療方面，曲馬多均發揮了極大的作用。

但隨著曲馬多的廣泛使用，曲馬多成癮的問題引起關注。據有關資料顯示，正常人如每天服用曲馬多200毫克，大約半年后會產生藥物依賴，而如果每天服用300到400毫克(6到8顆藥)甚至更多，可在短期內上癮。2008年，中國將鹽酸曲馬多作為精神藥品進行管制。

因此進行曲馬多濫用檢測的相關試劑及其產品的開發就成為需要。

發明內容

本發明以曲馬多為原料合成半抗原，從苯環上的O位接上交聯臂再與具有免疫原性的蛋白質偶聯，以此來獲得具有反應原性和免疫原性的完全抗原；將這一抗原應用于檢測卡中來進行曲馬多是否濫用的檢測。為了獲得針對半抗原的特異性抗體，交聯臂一般要遵循兩個原則：①盡量不要具備復雜的結構，一般以烴鏈為佳，這樣可以盡量避免產生抗交聯臂的抗體；②要具備一定的長度，一般為1-10個原子，最好是1-6個，這樣可以將半抗原暴露在蛋白質的外表，而不是被蛋白質遮掩住。因此合成的免疫抗原選擇的交聯劑一般是溴乙酸乙酯、溴丁酸乙酯或溴己酸乙酯等，再通過脫乙酯與蛋白質上的氨基反應，其交聯臂為結構簡單的烴鏈，長度為4-8個原子。

具體來說,本發明提供的一種曲馬多檢測抗原，其結構通式如下：

其中，m＝1，2，3，4，5

一些優選的實施方式中，大分子蛋白為牛血清白蛋白(BSA)、牛γ-球蛋白(BGG)或雞卵清蛋白(OVA)。

另一方面，本發明提供的曲馬多檢測抗原的制備方法，具體是：以曲馬多為原料，首先將曲馬多苯環上O位去甲基，然后通過溴丁酸乙酯在O-去甲曲馬多的O位上引出羧基，再脫去乙酯，通過羧基與蛋白質偶聯；其反應式如下：

反應式一：

反應式二：

其中，產物1：去甲曲馬多，

產物2：4-(3-(-((二甲基氨基)甲基)-羥基環己基)苯氧基)丁酸乙酯，

產物3：4-(3-(-((二甲基氨基)甲基)-羥基環己基)苯氧基)丁酸，