[發(fā)明專利]一種測(cè)定奧利司他膠囊中降解雜質(zhì)的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610077367.2
• 申請(qǐng)日: 2016-02-03
• 公開（公告）號(hào): CN105738506B
• 公開（公告）日: 2016-11-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杜志博;陳嘉智;邵詩(shī)雅;徐小林;彭韙
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中山萬漢醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京精金石專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11470
• 代理人: 劉曄

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種常用高效液相色譜法分離測(cè)定奧利司他膠囊中降解雜質(zhì)的方法。

背景技術(shù)

奧利司他于1987年首次發(fā)現(xiàn)，奧利司他(Orlistat)化學(xué)名為：(s)-2-甲酞氨基-4-甲基-戊酸(s)-1-[[(2s，3s)-3-己基-4-氧-2oxetany]甲基-十二烷酯，其化學(xué)式如下。商品名為賽尼可(Xenical)，是瑞士Hoffmann-LaRoche公司研發(fā)，并于1998年在新西蘭首次上市，1999年在美國(guó)上市。由于奧利司他作為一種強(qiáng)效、長(zhǎng)效胃腸道脂肪酶抑制劑，是一種非全身作用的、具有良好耐受性和有效性的新型減肥藥物。不用食欲抑制劑而治療肥胖，為肥胖癥的藥物治療開辟了新途徑。

奧利司他的降解雜質(zhì)主要有以下兩個(gè)來源：一是奧利司他原料及制劑在生產(chǎn)過程中，會(huì)產(chǎn)生生產(chǎn)工藝降解雜質(zhì)；二是奧利司他膠囊在穩(wěn)定性貯藏期間由于環(huán)境的影響會(huì)產(chǎn)生降解雜質(zhì)。這些降解雜質(zhì)會(huì)影響到藥品的純度和質(zhì)量，需要建立降解雜質(zhì)的分析方法來控制這些降解雜質(zhì)的含量。各降解雜質(zhì)的名稱和化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

在已有的技術(shù)中，美國(guó)藥典(USP)37版藥典提供了奧利司他膠囊的雜質(zhì)分析方法，但經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，使用USP37版藥典中收載的分析方法檢測(cè)時(shí)，開環(huán)物甲酯與奧利司他完全重疊，并且離主峰較近的工藝雜質(zhì)也無法與主峰分離。另外，公開發(fā)表的文獻(xiàn)中，參見《藥學(xué)學(xué)報(bào)》，49卷第3期，380～384頁(2014)和《JournalofchromatographyA》1116(2006)，153～15頁。這些參考文獻(xiàn)中發(fā)表的奧利司他膠囊雜質(zhì)分析方法，均無法有效分離本發(fā)明中提到的降解雜質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種測(cè)定奧利司他膠囊中降解雜質(zhì)的方法，其特征在于：所述方法采用高效液相色譜法，將雜質(zhì)混合對(duì)照品溶液及樣品溶液注入高效液相色譜儀，完成奧利司他膠囊中降解雜質(zhì)的測(cè)定；

所述色譜條件為：色譜柱：以硅膠實(shí)心球顆粒為填料的色譜柱；流動(dòng)相：流動(dòng)相A為酸性水溶液，流動(dòng)相B為有機(jī)溶劑，流動(dòng)相A的體積百分比與流動(dòng)相B的體積百分比的和始終保持為100％，進(jìn)行線性梯度洗脫。所述色譜柱優(yōu)選waters公司CortecsC18柱。

進(jìn)一步地，所述線性梯度如下：流動(dòng)相B的起始比例為體積比81～83％、保持16min，19min時(shí)升至體積比91％、保持3min，23min時(shí)升至體積比95％、保持6min，30min時(shí)降至體積比81～83％、保持7min。

具體地，所述流動(dòng)相A的溶質(zhì)為磷酸或高氯酸，體積百分比為0.005～0.025％；所述流動(dòng)相B選自甲醇、乙腈、乙醇、四氫呋喃中的一種或者兩種以上混合物。所述流動(dòng)相A的溶質(zhì)溶質(zhì)優(yōu)選為磷酸，體積百分比為選0.01％～0.1％，最優(yōu)選0.025％。所述流動(dòng)相B優(yōu)選為甲醇或乙腈，更優(yōu)選為乙腈。

具體地，所述流動(dòng)相的流速為0.5mL/min～2.0mL/min。優(yōu)選為1.3mL/min。

具體地，所述色譜柱溫度為25℃～40℃。優(yōu)選為35℃。

具體地，所述方法還包括檢測(cè)波長(zhǎng)，所述檢測(cè)波長(zhǎng)為190nm～205nm。優(yōu)選為195nm。

具體地，所述方法還包括進(jìn)樣量，所述進(jìn)樣量為10μL～50μL。

具體地，所述樣品溶液制備方法如下：取奧利司他膠囊樣品適量，用體積百分比為80％的乙腈溶液溶解并稀釋，配制成每1mL含奧利司他0.5～1.5mg的樣品溶液。

具體地，所述雜質(zhì)混合對(duì)照品溶液制備方法如下：取奧利司他原料，加入乙腈-水體積比為4∶1的混合溶液制成每1mL含0.5mg的奧利司他原料儲(chǔ)備液，分別取雜質(zhì)開環(huán)物異構(gòu)體、開環(huán)物、雜質(zhì)D、己基十一烷酮和二十一烷基亮氨酸雜質(zhì)對(duì)照品適量，取破壞溶液適量，加乙腈-水體積比為4∶1的混合溶液稀釋，制成每1mL含0.5mg的雜質(zhì)對(duì)照品貯備液，量取上述雜質(zhì)對(duì)照品貯備液1mL，置50mL量瓶中，用奧利司他原料儲(chǔ)備液稀釋至刻度，即得；所述破壞溶液通過酸、堿、氧、高溫和光照破壞奧利司他膠囊樣品，對(duì)破壞后的樣品加甲醇-水體積比為4∶1的混合溶劑超聲溶解并稀釋制得。

本發(fā)明所述的分離測(cè)定方法，可按照以下方法實(shí)現(xiàn)：