[發(fā)明專利]一種食品生物保鮮劑納他霉素的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610075944.4
• 申請日: 2016-02-03
• 公開（公告）號(hào): CN105524970A
• 公開（公告）日: 2016-04-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王力威;張帆
• 申請（專利權(quán)）人: 常州達(dá)奧新材料科技有限公司
• 主分類號(hào): C12P39/00
• 分類號(hào): C12P39/00;C12P19/62;C12R1/465;C12R1/78
• 代理公司: 暫無信息
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明公開了一種食品生物保鮮劑納他霉素的制備方法，屬于納他霉素制備技術(shù) 領(lǐng)域。

背景技術(shù)

納他霉素——近白色或奶油黃色結(jié)晶粉末，是一種無臭、無味，低劑量且安全性高 的食品防腐劑，通常以烯醇式結(jié)構(gòu)存在，它的作用機(jī)理是與真菌的麥角甾醇以及其他甾醇 基團(tuán)結(jié)合，阻遏麥角甾醇生物合成，從而使細(xì)胞膜畸變，最終導(dǎo)致滲漏，引起細(xì)胞死亡。在焙 烤食品用納他霉素對(duì)面團(tuán)進(jìn)行表面處理，有明顯的延長保質(zhì)期作用。

由于納他霉素能高效、專一性的抑制酵母菌和霉菌并具有良好的理化穩(wěn)定性以及 極低的毒性，因而納他霉素被用于醫(yī)療(外用)、食品、飼料、糧儲(chǔ)之中，特別是在食品原料保 鮮、食品防腐方面的應(yīng)用中顯示了良好的前景。但目前由于其極高的生產(chǎn)成本，使納他霉素 產(chǎn)品商業(yè)化應(yīng)用受到了極大的限制，僅作為高端防腐劑應(yīng)用，因?yàn)榧{他霉素通常條件下不 溶于水只溶于一定條件下的有機(jī)溶媒，所以它的提取方法不能經(jīng)濟(jì)運(yùn)行，因此開發(fā)一種經(jīng) 濟(jì)可行的納他霉素提取工藝對(duì)于目前來說是非常重要的事情。

目前納他霉素從發(fā)酵原液中提煉出來的過程通常包括用有機(jī)溶媒如甲醇、異丙醇 從濃縮法或板框壓濾法得到的菌絲體中浸提出來，隨后進(jìn)行蒸餾，脫去大部分有機(jī)溶劑，再 經(jīng)除蛋白雜質(zhì)、脫色、沉淀等過程將浸提出的納他霉素提純?yōu)槌跆嵛铮朔N初提取物再用離 子交換或其它方法進(jìn)一步純化，最后通過結(jié)晶，得到納他霉素晶體。但是該方法生產(chǎn)納他霉 素制劑，生產(chǎn)過程繁雜，周期長，有機(jī)溶劑與酸、堿消耗多，且納他霉素的失活率高，總收得 率往往低于70％，甚至低于50％。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明主要解決的技術(shù)問題：針對(duì)目前傳統(tǒng)方法在提煉納他霉素過程中，雖可以 將菌絲體浸提出來，最終通過蒸餾、脫色、沉淀、純化等步驟提煉得到納他霉素，但是該方法 生產(chǎn)過程繁雜，周期長，提煉得到的納他霉素失活率高，收率低，且有機(jī)溶劑與酸、堿消耗 多，原料浪費(fèi)極大的現(xiàn)狀，提供了一種將豬肉皮發(fā)酵后的發(fā)酵過濾液作為培養(yǎng)液，通過與胰 蛋白陳、酵母、甘露醇以及瓊脂混合，形成培養(yǎng)基，隨后將褐黃孢鏈霉菌、多行漢遜氏酵母 菌、納塔爾鏈霉菌和恰塔努加鏈霉菌，接種發(fā)酵培養(yǎng)基上，并經(jīng)過不同濃度的甲醇梯度淋 洗，得到菌絲淋洗液，最終將得到的菌絲淋洗液干燥，從而得到食品生物保鮮劑納他霉素的 制備方法。該方法生產(chǎn)過程簡單，避免了大量酸堿的使用，且操作過程中基本無廢水和廢渣 排放，符合節(jié)能環(huán)保的要求，最終制得的納他霉素收率提高至90％以上，活率達(dá)到95％以 上。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：

（1）取400～600g新鮮豬皮，用刮刀刮去豬皮表面殘留的毛根，削去殘余碎肉和皮下殘 余白色油脂，直至皮下毛孔顯露，隨后將刮好的豬皮用噴火槍再次去除豬毛及雜質(zhì)后，放入 清水中反復(fù)搓洗，洗至清水無色為止時(shí)倒入菠蘿篩中瀝干，得到處理后的新鮮豬皮；

（2）將上述處理后的新鮮豬皮放入直徑為7mm的孔板絞肉機(jī)中，絞碎得豬皮顆粒，倒入 2L的發(fā)酵罐中，并向發(fā)酵罐中加入豬皮顆粒質(zhì)量1～2倍的蒸餾水，充分混合均勻，密封發(fā)酵 罐，在溫度為38～58℃，相對(duì)濕度為60～65％下發(fā)酵3～5天，隨后提升溫度至40～60℃，相 對(duì)濕度至62～68％，再次發(fā)酵5～7天，待全部發(fā)酵結(jié)束，將發(fā)酵混合物取出，倒入臥式離心 機(jī)中，在1100～1200r/min的轉(zhuǎn)速下離心處理15～20min，去渣，留液，得發(fā)酵液，之后再將得 到的發(fā)酵液放置紫光燈下滅菌20～25min，得滅菌發(fā)酵液；

（3）按重量份數(shù)計(jì)，選取25～55份上述制得的滅菌發(fā)酵液、5～10份胰蛋白陳、15～20份 酵母和15～30份甘露醇，充分混合均勻，隨后再向混合液中加入10～15份瓊脂，放置在電爐 上加熱至沸騰，直至瓊脂粉溶化為止，攪拌形成初步培養(yǎng)基，之后再在形成的培養(yǎng)基中加入 去離子水，洗滌至pH值為5.2～5.5后，以5～10℃/min的速率提升溫度至95～105℃，滅菌15 ～25min，得發(fā)酵培養(yǎng)基；

（4）按接種比為1∶1∶1∶1，將褐黃孢鏈霉菌、多行漢遜氏酵母菌、納塔爾鏈霉菌和恰塔努 加鏈霉菌，接種發(fā)酵培養(yǎng)基上，在35～38℃下靜置培養(yǎng)12～15h；

（5）待培養(yǎng)結(jié)束，選用質(zhì)量濃度為35％的甲醇溶液，每隔2h對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行淋洗，淋洗3～ 5次后，再選用質(zhì)量濃度為38％的甲醇溶液，每隔4h對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行淋洗，淋洗4～6次；