[發(fā)明專利]一種測(cè)定黃曲霉毒素B1的信號(hào)放大核酸適配體傳感器及其制備方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201610069597.4 | 申請(qǐng)日： | 2016-02-01 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN105567836A | 公開（公告）日： | 2016-05-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王紅旗;劉繼紅;張迪;尹海燕;俎建英;孫江南;祁玉峰;張玲 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所 |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/68 | 分類號(hào)： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 鄭州優(yōu)盾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 41125 | 代理人： | 鄭園;張真真 |
| 地址： | 450002 河*** | 國(guó)省代碼： | 河南;41 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 測(cè)定 黃曲霉 毒素 sub 信號(hào) 放大 核酸 適配體 傳感器 及其 制備 方法 | ||
1.一種測(cè)定黃曲霉B1的信號(hào)放大核酸適配體傳感器，其特征在于：巰基修飾探針通過金- 硫鍵結(jié)合到絲網(wǎng)印刷電極的金電極上，AFB1核酸適配體通過結(jié)合到電極表面的巰基修飾探針 雜交組裝到電極上，核酸外切酶在電極表面參與反應(yīng)。
2.如權(quán)利要求1所述的測(cè)定黃曲霉毒素B1的信號(hào)放大核酸適配體傳感器，其特征在于：所 述巰基修飾探針為3’端修飾有巰基，5’端修飾有二茂鐵的巰基探針，其序列如SEQIDNO：1 所示；AFB1核酸適配體序列如SEQIDNO：2所示。
3.一種測(cè)定黃曲霉B1的信號(hào)放大核酸適配體傳感器的制備方法，其特征在于：制備步驟如 下：
(1)在絲網(wǎng)印刷電極的金電極表面滴加3μL含有1μM巰基修飾探針的1×AFB1結(jié)合緩沖溶 液，于4℃下自組裝12h；然后，電極用1×BB溶液清洗3次以除去弱吸附的探針；隨后， 電極在1mM巰基乙醇溶液中室溫封閉30min；接著往電極表面滴加1μM1×BB稀釋的AFB1適配體毒素溶液50μL，于37℃下雜交2h，然后用1×BB清洗3次后，將電極清洗干凈后 于4℃吹干，得到修飾好的電極；
(2)在修飾好的電極表面滴加50μL含有AFB1和核酸外切酶的1×BB溶液，室溫反應(yīng)20min， 用1×BB清洗3次后即可進(jìn)行差示脈沖電化學(xué)檢測(cè)。
4.如權(quán)利要求1或3所述的測(cè)定黃曲霉毒素B1的信號(hào)放大核酸適配體傳感器，其特征在于： 所述1×AFB1結(jié)合緩沖溶液與1×BB溶液相同，組分為10mMHepes，120mMNaCl，5mMKCl， 5mMMgCl2，pH7.0。
5.一種測(cè)定黃曲霉B1的信號(hào)放大核酸適配體傳感器作為檢測(cè)玉米中黃曲霉毒素B1的應(yīng)用。
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