[發明專利]一種奶牛金黃色葡萄球菌β-溶血素亞單位疫苗的制備方法及應用在審
| 申請號: | 201610068816.7 | 申請日: | 2016-01-21 |
| 公開(公告)號: | CN105641689A | 公開(公告)日: | 2016-06-08 |
| 發明(設計)人: | 錢泓;吳有強;宣春玲;查銀河;賈寶琴;曹珊珊;陳藻 | 申請(專利權)人: | 浙江海隆生物科技有限公司 |
| 主分類號: | A61K39/085 | 分類號: | A61K39/085;A61P31/04;A61P15/14;C07K14/31 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 312000 浙江省紹興市*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 奶牛 金黃色 葡萄球菌 溶血 單位 疫苗 制備 方法 應用 | ||
1.一種奶牛金黃色葡葡球菌β-溶血素亞單位疫苗的制備方法及應用,其特征在于:1) 金黃色葡葡球菌保護性抗原蛋白β-容血素的定點突變與克??;2)重組β-溶血素蛋白的表達 與純化;3)將重組β-溶血素蛋白與藥學上可接受的佐劑充分混勻后得到奶牛金黃色葡萄球菌 乳房炎重組亞單位疫苗。
2.權利要求1所述的金黃色葡萄球菌保護性抗原蛋白β-溶血素,其特征在于:
(a)由SEQIDNO.1所示的氨基酸組成的蛋白質;
(b)在(a)中的氨基酸序列經過取代、缺失或添加一個氨基酸或幾個氨基酸且具有金 黃色葡萄球菌保護性抗原蛋白β-溶血素抗原性的由(a)衍生的蛋白質;
(c)重組β-溶血素蛋白表達系統包括但不限于大腸桿菌,酵母,哺乳動物細胞以及昆蟲 細胞等。
3.權利要求1所述的奶牛金黃色葡萄球菌β-溶血素亞單位疫苗的制備方法,其特征在于 包括如下步驟:
1)定點突變金黃色葡萄球菌β-溶血素蛋白基因;
2)將定點突變的β-溶血素蛋白基因克隆到pET28a載體中;
3)將步驟2)獲得的表達載體轉化E.coliBL21(DE3),誘導表達獲得重組β-溶血素蛋白;
4)使用鎳柱親和層析純化步驟3)得到的重組β-溶血素蛋白;
5)將純化得到的重組β-溶血素蛋白與藥學上可接受的佐劑(如ISA206VG佐劑)充分 混勻后得到奶牛金黃色葡萄球菌乳房炎重組亞單位疫苗。
4.權利要求1所述的亞單位疫苗在預防或治療奶牛金黃色葡萄球菌乳房炎中的應用。
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