[發明專利]一種用于串珠藻的培養基及其應用有效
| 申請號: | 201610067835.8 | 申請日: | 2016-01-30 |
| 公開(公告)號: | CN105543098B | 公開(公告)日: | 2019-06-28 |
| 發明(設計)人: | 南芳茹;謝樹蓮;馮佳;呂俊平;劉琪 | 申請(專利權)人: | 山西大學 |
| 主分類號: | C12N1/12 | 分類號: | C12N1/12;C12R1/89 |
| 代理公司: | 山西五維專利事務所(有限公司) 14105 | 代理人: | 張福增 |
| 地址: | 030006 山*** | 國省代碼: | 山西;14 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 用于 串珠 培養基 及其 應用 | ||
本發明提供了一種用于串珠藻的培養基及其應用。串珠藻培養基的主要組成成分包括NaNO3,K2HPO4,KH2PO4,MgSO4.7H2O,CaCl2,NaCl,PIV金屬溶液,維生素B12溶液,維生素H溶液,維生素B1溶液,青霉素?鏈霉素溶液和蒸餾水。利用該培養基,通過對野外采集取得的新鮮串珠藻藻體進行實驗室人工培養,保持了串珠藻的室內生活狀態。本發明解決了之前串珠藻屬研究只限于野外采集生長種,而不能進行人工培養,故而不能進行后續生活史觀察、分子生物學分析等難題。
技術領域
本發明涉及藻類培養基,具體屬于淡水紅藻串珠藻的培養基及其應用。
背景技術
串珠藻屬是典型的淡水生紅藻類群,生境條件苛刻,一般在清冷潔凈的水體中固著生長,固著基質為沙土、河床或其他植物體,而且只有在環境因素變化不大,相對較穩定的水體中才能生長,如冷泉、井水、溪流等,呈點狀分布狀態。串珠藻對環境的適應性非常脆弱,導致該類群分布罕見。目前關于串珠藻的實驗室培養還未有報道,對其研究僅限于野外采集樣本之后,用福爾馬林溶液固定進行形態學觀察,或用硅膠干燥保存進行分子生物學研究。
發明內容
本發明的目的在于提供一種適合串珠藻生長的培養基,另一目的在于提供一種串珠藻的培養方法,最終實現對野外采集到的串珠藻進行實驗室人工培養。
本發明提供的一種適合串珠藻生長的培養基,組分及其濃度:NaNO3 2.90-2.94mM,K2HPO4 0.41-0.44mM,KH2PO4 1.27-1.31mM,MgSO4.7H2O 0.29-0.31mM,CaCl2 0.15-0.18mM,NaCl 0.42-0.44mM,PIV金屬溶液5.9-6.1mL/L,維生素B12溶液0.8-1.1 mL/L,維生素H溶液0.8-1.1mL/L,維生素B1溶液0.8-1.1mL/L,青霉素-鏈霉素溶液0.008-0.009 mL/L。
所述的PIV金屬溶液的組分及其含量:Na2EDTA.2H2O 1.9-2.1mM,FeCl3.6H2O0.35-0.37mM,MnCl2.4H2O 0.19-0.22mM,ZnCl2 0.035-0.038mM,CoCl2.6H2O 0.0082-0.0084mM,Na2MoO4.2H2O 0.015-0.018mM。
所述的維生素B12溶液通過如下方法制得:于200mLdH2O中加入pH7.8的HEPES緩沖液2.39-2.41g和維生素B12 0.025-0.027g。
所述的維生素H溶液通過如下方法制得:于200mLdH2O中加入pH7.8的HEPES緩沖液2.39-2.41g和維生素H 0.004-0.005g。
所述維生素B1溶液通過如下方法制得:于200mLdH2O中加入pH7.8的HEPES緩沖液2.39-2.41g和維生素B1 0.066-0.068g。
本發明提供的一種串珠藻培養基的制備方法,包括如下步驟:
1)于滅菌的1L容器中加900mL蒸餾水,攪拌下,按照上述培養基組分及其濃度計算各組分加入量,將除了維生素以外的各組分加入上述容器中;
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