[發明專利]SSR與SNP兩種分子標記配合使用進行玉米輔助高效育種的方法

有效

• 申請號: 201610065777.5
• 申請日: 2016-01-29
• 公開（公告）號: CN105603083B
• 公開（公告）日: 2019-12-17
• 發明（設計）人: 趙久然;宋偉;王鳳格;田紅麗;易紅梅;葛建镕;李瑞媛;王元東;段民孝;趙衍鑫;張如養;李春輝
• 申請（專利權）人: 北京市農林科學院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;A01H1/04;A01H1/02
• 代理公司: 11002 北京路浩知識產權代理有限公司
• 代理人: 王文君

1.SSR與SNP兩種分子標記配合使用進行玉米輔助高效育種的方法，其特征在于，以玉米自交系京SD127為供體親本，京SD121為輪回親本，通過回交轉育獲得BC₁F₁代群體，利用6個SSR標記和104個SNP標記對BC₁F₁代群體進行背景選擇，篩選背景回復率高的單株；

其中，6個SSR標記的信息如下：

104個SNP標記的信息如下：

其中，N為A、T、G或C。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)提取待測植株的基因組DNA；

2)以待測植株的基因組DNA為模板，利用擴增權利要求1所述SSR標記的引物，進行PCR擴增反應；

3)檢測PCR擴增產物。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟1)中采用CTAB法提取玉米的基因組DNA，待發苗后，取3～5葉期的葉片用于DNA提取。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟2)中PCR反應體系如下：DNA模板4μl，10mM dNTP 1.2μl，含2.5mM MgCl₂的10×反應緩沖液2μl，正、反向引物各0.125μl，5U/μlTaq DNA聚合酶0.2μl，ddH₂O補足至20μl；反應程序如下：94℃預變性5min；94℃變性40s，60℃退火35s，72℃延伸45s，35個循環；72℃延伸10min；4℃保存。

5.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟3)中用毛細管電泳檢測SSR標記的PCR擴增產物。

6.根據權利要求1-5任一項所述的方法，其特征在于，利用芯片技術對所述SNP標記進行檢測。