[發明專利]一種基于血液凝集活性的血栓通凍干粉針質量檢測方法

在審

• 申請號: 201610065217.X
• 申請日: 2016-01-29
• 公開（公告）號: CN105606831A
• 公開（公告）日: 2016-05-25
• 發明（設計）人: 唐進法;張國斌;裴莉昕;李偉霞;崔紅新;李宇輝;張帆
• 申請（專利權）人: 河南中醫學院
• 主分類號: G01N33/86
• 分類號: G01N33/86
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

1.一種基于血液凝集活性的血栓通凍干粉針質量檢測方法，其特征在于，由以下方法 實現：

（1）、制備供測試的血漿，將檸檬酸鹽緩沖液0.2ml裝入注射器，用注射器經成年雄性家 兔耳緣動脈吸取血液5ml，離心，得血漿；

（2）、將血栓通凍干粉針用生理鹽水倍比稀釋成10個濃度梯度；

（3）、將血漿點入血漿點樣孔板中，再將10個不同濃度梯度的血栓通凍干粉針分別加入 點入血漿的10個孔中，每個濃度重復3孔；并設陰性對照組；

（4）、檢測血凝塊形成的時間：用凝集檢測儀檢測血漿樣的血凝塊形成時間并記錄；

（5）、血栓通凍干粉針質量的判定：根據步驟（4）凝集檢測儀記錄的血凝塊形成的時間， 以不出現凝血塊的血栓通凍干粉針的最大稀釋倍數的時間作為其量值，用于判定血栓通凍 干粉針的質量，量值越大，血栓通凍干粉針的活血功效越好，質量越優，從而測定出血栓通 凍干粉針的質量。

2.根據權利要求1所述的基于血液凝集活性的血栓通凍干粉針質量檢測方法，其特征 在于，由以下方法實現：

（1）、制備供測試的血漿

在溫度20-26℃、濕度60%的環境下，將PH4.5的檸檬酸鹽緩沖液0.2ml裝入注射器，用 注射器經成年雄性家兔耳緣動脈吸取血液5ml，置于離心管中，以1500g的速度離心10min， 得血漿；

（2）、將血栓通凍干粉針稀釋成不同濃度，方法是，用質量濃度0.9%的生理鹽水將血栓 通凍干粉針倍比稀釋成10個濃度梯度；

所述的倍比稀釋是指稀釋后的下一級血栓通凍干粉針的濃度是上一級濃度的0.5倍；

（3）、將步驟（1）制得的血漿點入血漿點樣孔板中的3排，每排10孔，每孔0.1ml；另將血 漿點入另相鄰的3個孔中，每孔0.1ml，作為陰性對照組，在37℃下孵育5min，加入0.2ml人促 凝血酶；將步驟（2）制得的10個不同濃度梯度的血栓通凍干粉針0.1ml用排槍分別加入點入 血漿的10個孔中，每個濃度重復3孔，陰性對照組中加入質量濃度0.9%的生理鹽水0.1ml；

（4）、檢測血凝塊形成的時間：用凝集檢測儀檢測步驟（3）給出的各孔中血漿樣的血凝 塊形成時間并記錄；

（5）、血栓通凍干粉針質量的判定：根據步驟（4）凝集檢測儀記錄的血凝塊形成的時間， 在100min不出現凝血塊的血栓通凍干粉針的最大稀釋倍數作為其量值，用于判定血栓通凍 干粉針的質量，該量值越大，血栓通凍干粉針的活血功效越好，質量越優，從而測定出血栓 通凍干粉針的質量。

3.根據權利要求1或2所述的基于血液凝集活性的血栓通凍干粉針質量檢測方法，其特 征在于，所述的倍比稀釋是，將血栓通凍干粉針用生理鹽水稀釋成10%濃度溶液作為母液， 以倍比稀釋的方式進行稀釋，當2¹倍稀釋時，濃度為5.00%；當2²倍稀釋時，濃度為2.50%；當 2³倍稀釋時，濃度為1.25%以此類推，當在100min時，大于0.009766%濃度均不出現凝血反 應，則稱血栓通凍干粉針生物活性量值為10，按照本發明實驗條件下，常規指標檢測合格的 樣品，本方法檢測的生物活性量值為6以上，說明產品合格或較優，可進行工業化生產。