[發(fā)明專利]基于牛血清白蛋白-納米鉑/鉍的硫離子檢測試劑盒

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• 申請日: 2016-01-29
• 公開（公告）號: CN105717097A
• 公開（公告）日: 2016-06-29
• 發(fā)明（設計）人: 陳偉;沈奕珉;何少斌;鄧豪華;吳艷玉
• 申請（專利權）人: 福建醫(yī)科大學
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N21/31
• 代理公司: 福州智理專利代理有限公司 35208
• 代理人: 王義星

1.一種基于牛血清白蛋白-納米鉑/鉍的硫離子測定方法，其特征是在硫離子溶液中加入牛血清白蛋白-納米鉑/鉍溶液，混合后室溫靜置，在混合溶液中加入過氧化氫，3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽，含有乙二胺四乙酸的磷酸鹽緩沖溶液，混合后37℃溫度溫浴，根據652nm處的吸光度得到硫離子濃度；所述的牛血清白蛋白-納米鉑/鉍是由如下方法制備的：在5mL濃度為50mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5mL濃度為16mmol/L氯鉑酸溶液和0.5mL濃度為1.5mol/L氫氧化鈉溶液，混勻后水浴80℃下反應2h，反應后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-納米鉑水溶液，將牛血清白蛋白-納米鉑水溶液冷凍干燥得到牛血清白蛋白-納米鉑粉末，在0.6mL濃度為23.8mg/mL的牛血清白蛋白-鉑水溶液中加入0.6mL濃度為0.5mmol/L的硝酸鉍溶液和1.8mL濃度為10mmol/L，pH=7的磷酸鹽緩沖液，混勻后水浴80℃下反應2.5h，反應后溶液裝入截止分子量為3k的超濾管，6000r/min離心超濾，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-納米鉑/鉍的水溶液，將牛血清白蛋白-納米鉑/鉍水溶液冷凍干燥得到牛血清白蛋白-納米鉑/鉍粉末。

2.根據權利要求1所述的基于牛血清白蛋白-納米鉑/鉍的硫離子測定方法，其特征是所述的牛血清白蛋白-納米鉑/鉍與硫離子相互作用后其模擬過氧化物酶活性降低，催化過氧化氫氧化3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽顯色能力下降，催化反應產物在652nm處的吸光度減小。

3.根據權利要求1或2所述的基于牛血清白蛋白-納米鉑/鉍的硫離子測定方法，其特征是在0.4mL硫離子溶液中加入0.01mL濃度為4.76mg/mL的牛血清白蛋白-納米鉑/鉍溶液，混合后在室溫放置2分鐘，在混合溶液中加入1mL濃度為2mol/L的過氧化氫，0.2mL濃度為16mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽，2.39mL含有乙二胺四乙酸的濃度為100mmol/L，pH=5的磷酸鹽緩沖溶液，所述緩沖溶液中乙二胺四乙酸的濃度為4mmol/L，混合后37℃溫浴10分鐘，測定652nm波長處的吸光度，隨著硫離子濃度的增大，吸光度逐漸減小。

4.根據權利要求1或2或3所述的基于牛血清白蛋白-納米鉑/鉍的硫離子測定方法，其特征是檢測線性范圍為0.08~4μmol/L，檢測限為50nmol/L。

5.一種基于牛血清白蛋白-納米鉑/鉍的硫離子檢測試劑盒，其特征是試劑盒中有牛血清白蛋白-納米鉑/鉍溶液、過氧化氫溶液、3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽溶液和硫化鈉溶液，所述的牛血清白蛋白-納米鉑/鉍溶液作為a液，過氧化氫溶液作為b液，3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽溶液作為c液，硫化鈉溶液作為標準液。

6.根據權利要求5所述的基于牛血清白蛋白-納米鉑/鉍的硫離子檢測試劑盒，其特征是a液中含有濃度為0.02mg/mL的牛血清白蛋白-納米鉑/鉍溶液，所述的牛血清白蛋白-納米鉑/鉍溶液是用含有4mmol/L乙二胺四乙酸的濃度為100mmol/L，pH=5的磷酸鹽緩沖液配制而成的；b液中含有濃度為2mol/L的過氧化氫水溶液；c液中含有濃度為16mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺鹽酸鹽水溶液；標準液中含有濃度為0.8，1，3，5，10，20，40μmol/L的硫化鈉溶液。