[發(fā)明專利]一種同時檢測金匱腎氣片中五種有效成分含量的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610059542.5
• 申請日: 2016-01-28
• 公開（公告）號: CN105717246B
• 公開（公告）日: 2017-02-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周珍輝;黃淑霞
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東臺城制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 廣州新諾專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司44100
• 代理人: 華輝

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物分析領(lǐng)域，特別涉及一種金匱腎氣片中同時檢測馬錢苷、京尼平甘酸、毛蕊花糖苷、桂皮醛和丹皮酚含量的方法。

背景技術(shù)

金匱腎氣片系六味地黃系列中成藥，處方來自“醫(yī)圣”張仲景之手，記載于《金匱要略》。金匱腎氣片用于腎虛水腫，腰膝酸軟，小便不利，畏寒肢冷。不僅有六味地黃滋陰補(bǔ)腎的作用，而且能在補(bǔ)陰中助陽，從而達(dá)到陰陽同補(bǔ)的目的。

金匱腎氣片現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)收載于國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS-10439(ZD-0439)-2002-2011Z，其鑒別標(biāo)準(zhǔn)收載了1個顯微鑒別、3個薄層鑒別和2個含量測定，而金匱腎氣片處方中有10味藥。通過研究發(fā)現(xiàn)多種藥味的薄層色譜之間均存在陰性干擾，尚無有效分離方法進(jìn)行鑒別其有效成分，導(dǎo)致現(xiàn)有的質(zhì)量控制方法未能有效實現(xiàn)產(chǎn)品質(zhì)量的控制。且現(xiàn)有的2個有效成分的含量測定，需要分別提取供試液及采用不同的色譜系統(tǒng)檢測，實驗步驟繁瑣，且不能全面的監(jiān)測到產(chǎn)品的質(zhì)量水平。

發(fā)明內(nèi)容

針對上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種同時檢測金匱腎氣片中五種有效成分含量的方法。本方法中所述有效成分為馬錢苷、京尼平甘酸、毛蕊花糖苷、桂皮醛和丹皮酚，所述方法為高效液相色譜法，所述色譜條件為：

反相色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱；進(jìn)樣量：10μl；

流動相：流動相A：乙腈、流動相B：體積百分比為0.1％的磷酸水溶液，流動相A的體積百分比與流動相B的體積百分比的和始終保持為100％，進(jìn)行線性梯度洗脫，所述線性梯度洗脫、波長與流速如下：

梯度1---0～15min，流動相A與流動相B的體積百分比為(10～20％)∶(90～80％)，流速為1.0ml/min，檢測波長為230～245nm；

梯度2---15～30min，流動相A與流動相B的體積百分比為〔(10～20％)→(65～40％)〕∶〔(90～80％)→(35～60％)〕，流速為1.0ml/min，檢測波長為230～245nm；

梯度3---30～55min，流動相A與流動相B的體積百分比為(40～65％)∶(60～35％)，流速為1.0～1.2ml/min，檢測波長為284～294nm。

作為實施方式之一，本發(fā)明同時檢測金匱腎氣片中五種有效成分含量的方法中，所述線性梯度洗脫、波長與流速進(jìn)一步為：

梯度1---0～15min，流動相A與流動相B的體積百分比為15％∶85％，流速為1.0ml/min，檢測波長為240nm；

梯度2---15～30min，流動相A與流動相B的體積百分比為(15％→55％)∶(85％→45％)，流速為1.0ml/min，檢測波長為240nm；

梯度3---30～55min，流動相A與流動相B的體積百分比為55％∶45％，流速為1.2ml/min，檢測波長為286nm。

作為實施方式之一，本發(fā)明同時檢測金匱腎氣片中五種有效成分含量的方法中，所述線性梯度洗脫、波長與流速還可以進(jìn)一步為：

梯度1---0～15min，流動相A與流動相B的體積百分比為10％∶90％，流速為1.0ml/min，檢測波長為235nm；

梯度2---15～30min，流動相A與流動相B的體積百分比為(10％→65％)∶(90％→30％)，流速為1.0ml/min，檢測波長為245nm；

梯度3---30～55min，流動相A與流動相B的體積百分比為65％∶35％，流速為1.2ml/min，檢測波長為294nm。

作為實施方式之一，本發(fā)明同時檢測金匱腎氣片中五種有效成分含量的方法中，所述線性梯度洗脫中梯度3后面還可以添加一個過渡梯度，所述過渡梯度的流動相比例與所述梯度1相同，并沖洗至基線平穩(wěn)。以便連續(xù)進(jìn)樣。

作為實施方式之一，本發(fā)明同時檢測金匱腎氣片中五種有效成分含量的方法中，對照品溶液的配置方法如下：精密稱取馬錢苷、京尼平甘酸、毛蕊花糖苷、桂皮醛和丹皮酚對照品，用體積百分比為80％的甲醇溶液溶解并稀釋，使每1ml對照品溶液中含有0.10～0.14mg馬錢苷、0.04～0.08mg京尼平甘酸、0.07～0.11mg毛蕊花糖苷、0.15～0.25mg桂皮醛和0.15～0.25mg丹皮酚。