[發(fā)明專利]一種鹿角靈芝菌液發(fā)酵培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610058479.3
• 申請日: 2016-01-28
• 公開（公告）號: CN105586273B
• 公開（公告）日: 2018-07-03
• 發(fā)明（設計）人: 陳蕾蕾;趙雙枝;徐慧;周慶新;辛雪;王易芬;王未名;劉孝永
• 申請（專利權）人: 山東省農業(yè)科學院農產品研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P19/04;C12P33/00;A61K36/074;A61P35/00;C12R1/645
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 徐槐

1.一種鹿角靈芝菌液發(fā)酵培養(yǎng)方法，具體步驟如下：

(1)母種擴增

無菌條件下剖取小塊鹿角靈芝菌的母種，移接到斜面培養(yǎng)基上，加塞，至恒溫培養(yǎng)箱內，27℃中培養(yǎng)7天；

斜面培養(yǎng)基：馬鈴薯洗凈，去皮，稱取200g，切成小塊，與30g麥麩，加水1000mL煮沸，保持30min，過濾，濾液中加入瓊脂20g，加熱使其全部融化后，加入葡萄糖30g，磷酸二氫鉀2g，硫酸鎂1g，pH為7.0，分裝入試管，放入高壓滅菌鍋滅菌，溫度為121℃，時間為30min，制成試管斜面?zhèn)溆茫?/p>

(2)種子液制備

在斜面培養(yǎng)基上取1cm²的菌絲體，接種于種子液培養(yǎng)基中，置于搖床中27℃、150r/min培養(yǎng)7天；

種子液培養(yǎng)基，按質量分數計：15％土豆汁，3％麥麩，3％葡萄糖，0.2％磷酸二氫鉀，0.1％硫酸鎂，pH為7.0，培養(yǎng)液分裝于500mL三角瓶中，每瓶裝250mL，121℃滅菌30min，冷卻后取出備用；

(3)發(fā)酵罐發(fā)酵

將種子液按10％(v/v)接種量接種到發(fā)酵罐中，25-29℃恒溫培養(yǎng)80h，其中0-36小時菌絲體遲緩期內攪拌速度90-110r/min，36-70小時菌絲體對數生長期內攪拌速度110-130r/min，70-80小時菌絲體生長穩(wěn)定期內攪拌速度90-110r/min；

發(fā)酵罐培養(yǎng)基，按質量分數計：20％土豆汁，3％的麥麩，3％葡萄糖，0.2％磷酸二氫鉀，0.1％硫酸鎂，pH為7.0；

所述鹿角靈芝菌為菌株NCPSLZ1，保藏編號為CCTCC No.M2015796；保藏單位為中國典型培養(yǎng)物保藏中心；保藏日期為2015年12月29日；保藏地址為中國武漢大學；該菌株可用于發(fā)酵生產靈芝多糖和三萜類化合物，發(fā)酵80小時發(fā)酵液中胞內多糖和三萜類化合物產量可達137mg/L和55mg/L。

2.根據權利要求1所述鹿角靈芝菌液發(fā)酵培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(3)中0-36小時菌絲體遲緩期內攪拌速度100r/min。

3.根據權利要求1所述鹿角靈芝菌液發(fā)酵培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(3)中36-70小時菌絲體對數生長期內攪拌速度120r/min。

4.根據權利要求1所述鹿角靈芝菌液發(fā)酵培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(3)中70-80小時菌絲體生長穩(wěn)定期內攪拌速度100r/min。