[發(fā)明專利]馬蹄蕨藥材中多糖含量的紫外分光光度測(cè)定法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610058138.6
• 申請(qǐng)日: 2016-01-28
• 公開（公告）號(hào): CN105606556B
• 公開（公告）日: 2018-09-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張赟赟;楊海船;李燕婧;李嘉;姜平川
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院
• 主分類號(hào): G01N21/33
• 分類號(hào): G01N21/33
• 代理公司: 北京慕達(dá)星云知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 李冉

本發(fā)明公開了一種馬蹄蕨藥材中多糖含量的紫外分光光度測(cè)定法，以無水葡萄糖為對(duì)照，使用紫外分光光度計(jì)測(cè)定馬蹄蕨多糖提取物中多糖的含量。本發(fā)明完善了馬蹄蕨藥材的質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，為馬蹄蕨藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立奠定了基礎(chǔ)；而且，該法靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確；推廣和應(yīng)用本發(fā)明，可以確保馬蹄蕨藥材質(zhì)量，保障其臨床用藥的安全、有效、穩(wěn)定。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明馬蹄蕨藥材質(zhì)量控制技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種馬蹄蕨藥材中多糖含量的紫外分光光度測(cè)定法。

背景技術(shù)

馬蹄蕨，觀音座蓮科植物福建蓮座蕨(Angiopteris fokiensis Hieron.)，作為廣西的民族特色藥材，既屬于壯藥又屬于瑤藥，壯藥名為Maenzdaezma，瑤藥名為麻蹄涯。其通常以根莖人藥，在廣西主要分布于金秀、恭城、馬山等地，具有消炎止痛、清熱解毒、利濕、涼血止血等功效；主治腸炎、痢疾、胃痛、胃十二指腸潰瘍、肺結(jié)核咯血、腎炎水腫、功能性子宮出血、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、淋巴結(jié)結(jié)核、淋巴結(jié)炎、跌打損傷、癰瘡腫毒、槍炮傷、毒蛇毒蟲咬傷。長(zhǎng)久以來，在廣西的壯族、瑤族聚集地，馬蹄蕨是當(dāng)?shù)鼐用竦某Ｓ盟幉闹弧Ｓ捎趬选幦嗣耖L(zhǎng)期生活在山區(qū)，跌打損傷和蟲蛇咬傷經(jīng)常發(fā)生，馬蹄蕨即被作為常用藥材，常備家中。近些年來，在當(dāng)?shù)氐拿褡逄厣t(yī)院中，也被醫(yī)生常用于各類患者，有著較好的藥用價(jià)值。

馬蹄蕨作為常用民族藥材先后被收入《中國(guó)現(xiàn)代瑤藥》和《壯藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(第三冊(cè))，然而標(biāo)準(zhǔn)中也僅有簡(jiǎn)單的理化鑒別。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確的馬蹄蕨藥材中多糖含量的紫外分光光度測(cè)定法，以確保藥材質(zhì)量，保障其臨床用藥的安全、有效、穩(wěn)定。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：馬蹄蕨藥材中多糖含量的紫外分光光度測(cè)定法，以無水葡萄糖為對(duì)照，使用紫外分光光度計(jì)測(cè)定馬蹄蕨多糖提取物中多糖的含量。

8.無水葡萄糖的濃度為5-500mg/L，馬蹄蕨多糖提取物的濃度為10-200μg/ml。

上述馬蹄蕨藥材中多糖含量的紫外分光光度測(cè)定法，包括以下步驟：

A、將無水葡萄糖對(duì)照品用蒸餾水配制成濃度為5-500mg/L的對(duì)照品溶液；

B、將蒽酮溶解于濃硫酸溶液中，配制成1-3g/L的蒽酮-硫酸試劑；

C、將對(duì)照品溶液與蒽酮-硫酸試劑反應(yīng)，放入紫外分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為620nm，所得吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并按照標(biāo)準(zhǔn)曲線根據(jù)比爾朗伯定律得出回歸曲線方程；

D、將馬蹄蕨多糖提取物樣品按對(duì)照品溶液方法制備，并進(jìn)行吸光度測(cè)定，根據(jù)回歸曲線方程計(jì)算樣品中多糖的含量。

步驟A按以下操作進(jìn)行：精密稱取無水葡萄糖對(duì)照品100mg，置于100mL容量瓶中，加水適量使溶解，稀釋至刻度，搖勻；精密吸取10mL置于100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，即得0.1g/L的葡萄糖對(duì)照品溶液。

步驟B按以下操作進(jìn)行：準(zhǔn)確稱取0.2g蒽酮，溶解于100mL濃硫酸溶液中，配制成0.2％蒽酮-硫酸試劑。

步驟C按以下操作進(jìn)行：精密量取0.1g/L的葡萄糖對(duì)照品溶液0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.6、0.8ml，分別置10ml具塞刻度試管中，各加蒸餾水至1.0ml，搖勻，分別加入0.2％蒽酮-硫酸試劑4ml，迅速浸于冰水浴中冷卻，各管加完后一起浸于沸水浴中，水浴煮沸10分鐘，取出，用自來水冷卻，室溫放置10分鐘，以蒸餾水為空白，照紫外-可見分光光度法，在620mn波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度；以吸光度值為縱坐標(biāo)，葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。