[發(fā)明專利]馬蹄蕨藥材中多糖含量的紫外分光光度測定法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610058138.6
• 申請日: 2016-01-28
• 公開（公告）號: CN105606556B
• 公開（公告）日: 2018-09-21
• 發(fā)明（設計）人: 張赟赟;楊海船;李燕婧;李嘉;姜平川
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33
• 代理公司: 北京慕達星云知識產(chǎn)權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 李冉

1.一種馬蹄蕨藥材中多糖含量的紫外分光光度測定法，其特征在于，以無水葡萄糖為對照，使用紫外分光光度計測定馬蹄蕨多糖提取物中多糖的含量；

所述的馬蹄蕨藥材中多糖含量的紫外分光光度測定法，包括以下步驟：

A、將無水葡萄糖對照品用蒸餾水配制成濃度為5-500mg/L的對照品溶液；

B、將蒽酮溶解于濃硫酸溶液中，配制成1-3g/L的蒽酮-硫酸試劑；

C、將對照品溶液與蒽酮-硫酸試劑反應，放入紫外分光光度計進行檢測，檢測波長為620nm，所得吸光度繪制標準曲線，并按照標準曲線根據(jù)比爾朗伯定律得出回歸曲線方程；

D、精密吸取濃度為50μg/ml的馬蹄蕨多糖提取物1ml，加入0.2％蒽酮-硫酸試劑4ml，迅速浸于冰水浴中冷卻，各管加完后一起浸于沸水浴中，水浴煮沸10分鐘，取出，用自來水冷卻，室溫放置10分鐘，依法測定吸光度值，根據(jù)標準曲線計算樣品中多糖含量；

所述馬蹄蕨多糖提取物的制備方法，包括以下步驟：

a、將1kg馬蹄蕨藥材粉碎成粗粉，加60％乙醇8L加熱回流2次，每次2小時，過濾，棄濾液，收集藥渣，除去脂溶性成分；

b、藥渣加0.3mol/L稀鹽酸8L加熱回流提取2次，每次2小時，過濾，棄藥渣，收集濾液并濃縮，得膏150g；

c、濃縮液加乙醇使乙醇濃度達到80％，靜置過夜，過濾，收集沉淀，加水溶解沉淀，過濾，濾液濃縮成膏，經(jīng)真空冷凍干燥即得濃度為10-200μg/ml的馬蹄蕨多糖提取物。

2.根據(jù)權利要求1所述的馬蹄蕨藥材中多糖含量的紫外分光光度測定法，其特征在于：步驟A按以下操作進行：精密稱取無水葡萄糖對照品100mg，置于100mL容量瓶中，加水適量使溶解，稀釋至刻度，搖勻；精密吸取10mL置于100mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，即得0.1g/L的葡萄糖對照品溶液。

3.根據(jù)權利要求1所述的馬蹄蕨藥材中多糖含量的紫外分光光度測定法，其特征在于：步驟B按以下操作進行：準確稱取0.2g蒽酮，溶解于100mL濃硫酸溶液中，配制成0.2％蒽酮-硫酸試劑。

4.根據(jù)權利要求1所述的馬蹄蕨藥材中多糖含量的紫外分光光度測定法，其特征在于：步驟C按以下操作進行：精密量取0.1g/L的葡萄糖對照品溶液0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.6、0.8ml，分別置10ml具塞刻度試管中，各加蒸餾水至1.0ml，搖勻，分別加入0.2％蒽酮-硫酸試劑4ml，迅速浸于冰水浴中冷卻，各管加完后一起浸于沸水浴中，水浴煮沸10分鐘，取出，用自來水冷卻，室溫放置10分鐘，以蒸餾水為空白，照紫外-可見分光光度法，在620mn波長處測定吸光度；以吸光度值為縱坐標，葡萄糖濃度為橫坐標，繪制標準曲線。