[發明專利]用于治療皮膚燒傷的皮膚貼片及其制備方法

有效

• 申請號: 201610057407.7
• 申請日: 2016-01-27
• 公開（公告）號: CN105617461A
• 公開（公告）日: 2016-06-01
• 發明（設計）人: 曾憲卓;張哲
• 申請（專利權）人: 深圳愛生再生醫學科技有限公司
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36;A61L27/38;A61L27/60;A61L27/24
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于治療皮膚燒傷的皮膚貼片的制備方法，其特征在于，包括以 下步驟：

分別獲取脂肪干細胞和異體皮基質；

將所述脂肪干細胞與膠原溶液混合后接種于所述異體皮基質；

其中，所述脂肪干細胞來源于皮膚燒傷患者自體。

2.根據權利要求1所述的用于治療皮膚燒傷的皮膚貼片的制備方法，其 特征在于，所述脂肪干細胞的終濃度為(2～4)×10⁴個/ml。

3.根據權利要求1所述的用于治療皮膚燒傷的皮膚貼片的制備方法，其 特征在于，所述膠原溶液中，膠原的質量分數為0.1～0.3％。

4.根據權利要求2所述的用于治療皮膚燒傷的皮膚貼片的制備方法，其 特征在于，所述脂肪干細胞的獲取過程，包括以下步驟：

無菌條件下，取所述皮膚燒傷患者的脂肪組織，剔除脂肪中肉眼可見的 血管和纖維部分，經PBS溶液清洗后，剪碎，酶解振蕩消化20～60分鐘，用 完全培養基中止消化，再置于冰浴中吹打消化10～20分鐘，過濾，去除未消 化的脂肪組織和結締組織后，對濾液進行離心，去除上層油滴，取下層脂肪 細胞，PBS清洗后，即獲得原代脂肪干細胞。

5.根據權利要求4所述的用于治療皮膚燒傷的皮膚貼片的制備方法，其 特征在于，所述脂肪干細胞的獲取過程還包括以下步驟：

洗滌所述原代脂肪干細胞，去除紅細胞，用完全培養基重懸，然后接種 于多聚鳥氨酸包被的培養板上，培養2～6小時，移去上清液后胰酶消化，去 除未消化的成纖維細胞和內皮細胞，即獲得純化后的原代脂肪干細胞。

6.根據權利要求5所述的用于治療皮膚燒傷的皮膚貼片的制備方法，其 特征在于，所述脂肪干細胞的獲取過程還包括以下步驟：

取純化后的原代脂肪干細胞以0.5～2×10⁵個/ml的密度接種于DMEM培 養基進行擴增培養7～10天，每隔2-3天換液一次。

7.根據權利要求6所述的用于治療皮膚燒傷的皮膚貼片的制備方法，其 特征在于，所述DMEM培養基中添加有2～5％人血清、5～15ng/ml的ITS、 50～150U/ml的鏈霉素、50～150U/ml青霉素、5～35ng/ml的EGF和5～15ng/ml 的LIF。

8.根據權利要求1所述的用于治療皮膚燒傷的皮膚貼片的制備方法，其 特征在于，所述異體皮基質的獲取過程，包括以下步驟：

取健康豬腹部或背部皮進行脫脂脫毛處理，去掉0.2～0.6mm的表皮，制 成厚度為0.2～0.4mm的真皮層皮片，清洗后消毒20～40分鐘，反復清洗，于 消化液中消化2～4天，反復清洗皮片，然后加入非離子型表面活性劑孵育2～4 天，至細胞成分完全去除，獲得脫細胞真皮，然后分別用氯化鈉和PBS反復 沖洗，即獲得異體皮基質。

9.根據權利要求8所述的用于治療皮膚燒傷的皮膚貼片的制備方法，其 特征在于，所述消化液中包含有質量百分數為0.10～0.40％胰蛋白酶、 0.01～0.03％乙二酸乙二胺和0.01～0.03％氫氧化鈉。

10.一種用于治療皮膚燒傷的皮膚貼片，其特征在于，由權利要求1-9 任一項所述的用于治療皮膚燒傷的皮膚貼片制備方法所獲得的。