[發(fā)明專利]一種ACE抑制酶解液及其制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610052748.5
• 申請日: 2016-01-26
• 公開（公告）號: CN105483196A
• 公開（公告）日: 2016-04-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張建華;吳秉宇;姚曉敏;錢炳俊;湯慧勤
• 申請（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;A61K38/01;A61P9/12;A23L33/18
• 代理公司: 上海旭誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31220
• 代理人: 鄭立

1.一種ACE抑制酶解液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將扇貝裙邊洗凈、烘干、粉碎，過篩，得到扇貝裙邊粉；

2)向磷酸鹽緩沖液中里加入所述扇貝裙邊粉以及α-胰凝乳蛋白酶，混勻，進 行水解反應(yīng)，高溫終止水解反應(yīng)，離心，取上清，得到α-胰凝乳蛋白酶酶解液；

3)向所述α-胰凝乳蛋白酶酶解液中加入磷酸氫二鉀溶液將pH調(diào)節(jié)至7.5， 然后添加羧肽酶A和羧肽酶B，混勻，進行水解反應(yīng)，高溫終止水解反應(yīng)，得到 羧肽酶A/B酶解液；

4)將所述羧肽酶A/B酶解液放入1000DaCE透析袋，浸沒于去離子水中透 析，小于1000Da的組分擴散至去離子水中，將帶有所述小于1000Da的組分的去 離子水裝入500DaCE透析袋內(nèi)，浸沒于去離子水中透析，得到留在透析袋內(nèi)的 500-1000Da的組分，即得到所述ACE抑制酶解液。

2.如權(quán)利要求1所述的ACE抑制酶解液的制備方法，其特征在于，所述步 驟1)具體為：將扇貝裙邊用水反復(fù)清洗3次，然后置于烘箱中65℃烘干，將烘干 的扇貝裙邊粉碎，過60目篩，得到扇貝裙邊粉。

3.如權(quán)利要求1所述的ACE抑制酶解液的制備方法，其特征在于，所述步 驟2)具體為：向60mL0.035MpH8.0磷酸鹽緩沖液中里加入4g的所述扇貝裙邊 粉以及24mg800U/mgα-胰凝乳蛋白酶，漩渦混勻，在37℃下水解反應(yīng)5h，高 溫終止水解反應(yīng)，離心，取上清，得到α-胰凝乳蛋白酶酶解液。

4.如權(quán)利要求1所述的ACE抑制酶解液的制備方法，其特征在于，所述步 驟3)具體為：取所述α-胰凝乳蛋白酶酶解液9.8mL，通過加入磷酸氫二鉀溶液 將pH調(diào)節(jié)至7.5，然后添加100μL200U/mL羧肽酶A和100μL200U/mL羧 肽酶B，漩渦混勻，于45℃下水解反應(yīng)8h，高溫終止水解反應(yīng)，得到羧肽酶A/B 酶解液。

5.如權(quán)利要求1所述的ACE抑制酶解液的制備方法，其特征在于，所述步 驟4)中兩次透析的時間均為10-14h，期間均換一次去離子水。

6.一種如權(quán)利要求1所述的ACE抑制酶解液的制備方法制得的ACE抑制 酶解液。

7.如權(quán)利要求6所述的ACE抑制酶解液的制備方法制得的ACE抑制酶解 液，其特征在于，所述ACE抑制酶解液的半抑制濃度為800-900μg/mL。

8.如權(quán)利要求7所述的ACE抑制酶解液的制備方法制得的ACE抑制酶解 液，其特征在于，所述ACE抑制酶解液的半抑制濃度為893μg/mL，所述ACE抑 制酶解液中分子的大小為500-1000Da。

9.如權(quán)利要求6所述的ACE抑制酶解液的制備方法制得的ACE抑制酶解 液，其特征在于，所述ACE抑制酶解液來自扇貝裙邊，所述扇貝裙邊的蛋白質(zhì)含 量為50-55％；所述扇貝裙邊的脯氨酸含量為200-210nmol/mg，占所述扇貝裙邊的 總蛋白質(zhì)含量的5.0-5.5％。

10.一種如權(quán)利要求6所述的ACE抑制酶解液的制備方法制得的ACE抑制 酶解液在制備降壓藥和/或降壓食品方面的應(yīng)用。