[發明專利]紫變青霉QL-9204及在轉化根皮苷制備根皮素中的應用

有效

• 申請號: 201610051127.5
• 申請日: 2016-01-25
• 公開（公告）號: CN105543108B
• 公開（公告）日: 2019-03-05
• 發明（設計）人: 梅建鳳;李靚;金航;應國清;王鴻;易喻
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P7/26;C12R1/80
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

1.紫變青霉(Penicillium purpurogenum)QL-9204，保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號：CCTCC No：M 2015781，保藏日期2015年12月25日，地址：中國，武漢，武漢大學；郵編：430072。

2.一種權利要求1所述紫變青霉QL-9204在生物轉化根皮苷制備根皮素中的應用。

3.如權利要求2所述的應用，其特征在于所述的應用是以紫變青霉QL-9204經產酶培養后的發酵液抽濾獲得的濾液為催化劑，以根皮苷為底物，以甲醇為助溶劑構成轉化體系，在28～30℃、200～250r/min條件下進行轉化反應，轉化反應結束后，將轉化液分離純化，獲得根皮素。

4.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述底物根皮苷的終濃度為20～80mg/L轉化體系。

5.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述助溶劑甲醇的體積終濃度為2～8ml/L轉化體系。

6.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述催化劑用量以抽濾前發酵液中干菌體重量計為2.5～6.0g/L轉化體系。

7.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述紫變青霉QL-9204產酶培養方法為：(1)活化培養：將紫變青霉QL-9204菌種孢子接種于斜面培養基，于28～30℃恒溫培養2～3天，獲得斜面孢子，所述的斜面培養基為馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基；(2)種子擴大培養：挑取步驟(1)活化培養后紫變青霉QL-9204斜面孢子接種至種子培養基中，于28～30℃、200～250r/min振蕩條件下培養2～3天，得種子液，所述種子培養基為馬鈴薯葡萄糖培養基；(3)產酶培養：將種子液以體積濃度5～8％的接種量接種至發酵培養基中，于28℃、200r/min恒溫振蕩條件下培養5天，獲得發酵液；所述發酵培養基組成為：蔗糖2～5g/L，(NH₄)₂SO₄ 4～6g/L，NaCl 5g/L，KH₂PO₄ 5g/L，MgSO₄ 1g/L，MnSO₄ 1g/L，溶劑為水，pH 6～7。

8.如權利要求7所述的應用，其特征在于所述發酵培養基組成為：蔗糖2g/L，(NH₄)₂SO₄6g/L，NaCl 5g/L，KH₂PO₄ 5g/L，MgSO₄ 1g/L，MnSO₄ 1g/L，溶劑為水，pH為6。

9.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述分離純化的方法為：在生物轉化反應結束后，轉化體系用等體積的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液于圓底燒瓶中，45℃下減壓蒸干乙酸乙酯后，再加入等同原轉化體系體積的甲醇溶解殘留物；甲醇溶液用濾紙過濾后，轉入另一潔凈圓底燒瓶中，45℃下減壓蒸干甲醇后，加少量甲醇溶解殘留物，甲醇溶液轉入潔凈燒杯中，減壓干燥后即得根皮素。

10.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述轉化反應的條件為：在28～30℃、200～250r/min恒溫振蕩條件下轉化8～15h。