[發(fā)明專利]用于檢測(cè)黃曲霉毒素的單克隆抗體及酶聯(lián)免疫方法與試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610051042.7
• 申請(qǐng)日: 2016-01-26
• 公開（公告）號(hào): CN105524168B
• 公開（公告）日: 2020-05-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 袁宗輝;陶燕飛;彭大鵬;楊碧嘉;王玉蓮;潘源虎;陳冬梅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K16/14
• 分類號(hào): C07K16/14;C12N5/20;G01N33/577;C12R1/91
• 代理公司: 武漢開元知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 42104
• 代理人: 徐紹新

1.一種非診斷目的檢測(cè)黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的酶聯(lián)免疫方法，包括以下步驟：

1)將黃曲霉毒素B2肟與牛血清白蛋白偶聯(lián)得到包被原；

2)將包被原稀釋成0.33μg/mL后包被固相載體；

3)用保藏號(hào)為CCTCC NO:C201558的雜交瘤細(xì)胞株AFB1/3B9制備單克隆抗體；

4)將單克隆抗體稀釋35000倍，制成單克隆抗體工作液；

5)樣品處理：準(zhǔn)確稱取飼料樣品1±0.05g于50mL離心管中，加入4mL乙腈、1mL丙酮，混合均勻，4000r/min離心5min，取上清1mL吹干，加入2mL的PBS緩沖液溶解，作為待測(cè)樣品溶液；

6)向固相載體中加入待測(cè)樣品溶液和單克隆抗體工作液；

7)加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗鼠IgG抗體工作液；

8)加入底物液，反應(yīng)終止后用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)定光密度值并計(jì)算含量。