[發(fā)明專利]一種硝酸還原酶測定試劑盒與應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201610048426.3 | 申請(qǐng)日： | 2016-01-25 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN105543330A | 公開（公告）日： | 2016-05-04 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 丁偉;程茁 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 東北農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/26 | 分類號(hào)： | C12Q1/26 |
| 代理公司： | 北京國智京通知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11501 | 代理人： | 孫文彬 |
| 地址： | 150030 黑龍*** | 國省代碼： | 黑龍江;23 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 硝酸 還原酶 測定 試劑盒 應(yīng)用 | ||
1.一種硝酸還原酶測定試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒包括了以下液體：
A液：用1％(V/V)的1-丙醇1L作溶劑溶解31.2gNaH2PO4配制0.2MNaH2PO4溶液；
B液：用1％(V/V)的1-丙醇1L作溶劑溶解71.6gNa2HPO4配成0.2MNa2HPO4溶液；
C液：1％(W/V)的對(duì)-氨基苯磺酸溶液；
D液：0.2％(W/V)的α-萘胺溶液。
2.一種硝酸還原酶測定試劑盒的應(yīng)用，其特征在于：所述的應(yīng)用具體為以下步驟：
步驟一：取A液16mL和B液84mL置于試管中均勻混合，配成pH7.5的提取液；
步驟二：取植物樣品0.3-0.5克左右剪碎裝入試管，記錄樣品重量。加入步驟一提取液6mL，抽真空 1-2分鐘；
步驟三：從步驟二試管中取出1mL溶液放入潔凈試管中。把裝有樣品的反應(yīng)試管吹氮?dú)?0秒后用錫 紙封住試管口，將該試管放入30-35℃水浴中保溫1小時(shí)，取反應(yīng)液1mL放入潔凈試管；
步驟四：向步驟三裝有樣品的試管中加入1mL提取液，再放入30-35℃水浴中保溫1小時(shí)后，取反應(yīng) 液1mL放入潔凈試管；
步驟五：向步驟四裝有樣品的試管中加入1mL提取液，放入30-35℃水浴中保溫1小時(shí)，取反應(yīng)液1mL 放入潔凈試管；
步驟六：向上述獲得的4支裝有1mL反應(yīng)液的試管中分別加入去離子水4mL，分別加入C液1mL和D 液1mL，用提取液1mL加入4mL去離子水后分別加入C液1mL和D液1mL作空白對(duì)照；
步驟七：分光光度計(jì)540nm處波長處測定樣品光密度值，取同一時(shí)間的最佳光密度值計(jì)算硝酸還原酶 活性，單位為：μMNO2-g-1FWh-1。
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